生物化学：第三章 蛋白质(4周周二) .pdf

回顾与思考  多肽 肽键、氨基酸顺序、氨基酸残基 肽的pI计算 肽链的水解 肽的化学合成  课前思考题 在固相肽合成中，为什么使用HF将目标肽段从固相 载体上解离出来？试从化学反应原理剖析。 第三章主要内容 一．蛋白质概述 二．氨基酸 (重点) 三．多肽（重点） 四．蛋白质的结构（重点） 五．蛋白质结构与功能（重点） 六．蛋白质的性质（重点） 七．蛋白质的分离纯化与鉴定（重点） 四、The Structures of Proteins 1. Definition of Protein Structural Levels  蛋白质结构非常复杂。  1969年，IUPAC对蛋白质高级结构的不同 层次作了界定。  一级结构：肽链的线性结构。 空间结构：肽链的卷曲、折叠等。包括 二级、三级和四级结构。 Four Levels of Protein Structure  Primary structure the linear sequence of amino acids in the chain and the location of the disulfide bridges (二硫键).  Secondary structure the conformation (构 象) of segments of the backbone chain （主链） of a protein.  Tertiary structure the three-dimensional arrangement of all the atoms in the protein.  Quaternary structure the way the subunits (亚基) are arranged in space. Four Levels of Protein Structure 亚基 四、The Structures of Proteins 2. Primary Structure  蛋白质的一级结构包括以下内容： 组成蛋白质的多肽链数目 多肽链的氨基酸顺序（最重要的内容） 多肽链内或链间二硫键的数目和位置 牛 胰 核 糖 核 酸 酶 的 一 级 结 构 蛋白质一级结构的测定  1953年，F. Sanger 测定了胰岛素的一级 结构，1958年获 Nobel Chemical Prize。 蛋白质一级结构测定内容 ① 蛋白质中氨基酸组成，根据蛋白质分子量，计 算出构成蛋白质的各种氨基酸的数量。 ② 蛋白质分子中多肽链的数目。 ③ 二硫键的断裂及多肽链的拆分。 ④ 各多肽链的选择性降解及各肽段的氨基酸顺序 测定。 ⑤ 重叠法拼凑出整条多肽链的氨基酸顺序。 ⑥ 多肽链中二硫键位置的确定。 蛋白质一级结构测定步骤及方法 组成分析 纯蛋白质 氨基酸组成 N-端分析 纯蛋白质 肽链数目 拆分 选择性水解 纯蛋白质 各条肽链 氨基酸顺序分析 各肽段的氨基酸顺序 小肽段 （至少两组）