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酿酒酵母skpl和rav2基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达的中期报告
本文报告了酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae中两个重要的基因SKPL和RAV2的克隆以及在大肠杆菌中的表达情况。该研究的目的是为了研究这两个基因在酿酒过程中的作用及其对酒精发酵的影响。
我们首先从酿酒酵母中分离出SKPL和RAV2基因的DNA序列,并利用PCR技术进行扩增和纯化。随后将两个基因分别克隆到大肠杆菌的表达载体pET28a中,构建了SKPL和RAV2在大肠杆菌中的表达质粒。我们通过DNA测序验证了两个基因的正确性和质量。
进一步的,我们对克隆的表达质粒进行了大肠杆菌的转化、发酵和表达,通过蛋白质印迹分析和Western blotting技术证实了SKPL和RAV2基因成功地在大肠杆菌中表达。同时,我们还对表达后的蛋白质进行了纯化和鉴定,发现其具有很好的稳定性和酶活性,初步证明了这两个基因在大肠杆菌中的表达是成功的。
总之,通过本研究的克隆和表达实验,我们成功地获得了酿酒酵母SKPL和RAV2基因表达质粒,并成功在大肠杆菌中表达了这两个基因,为下一步对这两个基因的功能研究提供了基础。
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