福建柏叶片蛋白质双向电泳技术优化.pdf

- 森林与环境学报　 2017,37(1):54 59 第37卷 第 1期 Journal of Forest and Environment 2017年1月 DOI:10.13324/ ki.jfcf.2017.01.009 福建柏叶片蛋白质双向电泳技术优化 1,2 1 2 1 3 1 杨德明 ,张娅欣 ,沈少炎 ,荣俊冬 ,何天友 ,郑郁善 (1.福建农林大学林学院,福建福州350002;2.福建农林大学工业原料研究所,福建福州350002; 3.福建农林大学艺术园林学院,福建福州350002) 摘要:蛋白质双向电泳是蛋白质组学研究方法之一,但蛋白质双向电泳技术体系却因物种不同而有所差异,因而蛋白质 双向电泳体系的建立是进行蛋白质分离、鉴定的首要步骤。本文对福建柏叶片蛋白质提取方法、IPG胶条、等电聚焦参数 - 设定、丙烯酰胺分离胶浓度等因子进行单因素分析,对福建柏双向电泳技术进行优化。结果表明,采用三氯乙酸 丙酮提 取福建柏叶片的蛋白点多且图像清晰,pH4~7 的IPG 胶条最适合福建柏叶片蛋白的分离,等电聚焦参数设定为 20 000 Vh,浓度为10%的分离胶进行福建柏双向电泳最好。本研究初步建立了福建柏叶片蛋白质双向电泳体系,为深入 研究福建柏蛋白质组学提供依据。 关键词:双向电泳;福建柏;蛋白质组;等电聚焦;pH - - - 中图分类号:Q946.1 文献标识码:A 文章编号:2096 0018(2017)01 0054 06 Protocols optimization in two-dimensional electrophoresis of Fokienia hodginsii leaves total protein 1,2 1, 2 1 3 1 YANG Deming ,ZHANG Yaxin ,SHEN Shaoyan ,RONGJundong ,HE Tianyou ,ZHENG Yushan (1.College of forestry,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou,Fujian 350002,China; 2.Institute of Bamboo,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou,Fujian 350002,China; 3.College of Landscape,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou,Fujian 350002,China;) Abstract:In order to study the most efficient 2-DE protocol of Fokienia hodginsii proteomics,three different methods including TCA-acetone,phenol extraction method and TCA-phenol extraction method were tested in t