食品中D-异抗坏血酸的测定 高效液相色谱法（征求意见稿）.doc

DB33/T ××××—2005 PAGE PAGE 1 吉林省卫生厅 发布2012-0-0实施2012-0-发布食品中D-异抗坏血酸的测定 高效液相色谱法Determination of D-iso 吉林省卫生厅 发布 2012-0-0实施 2012-0-发布 食品中D-异抗坏血酸的测定 高效液相色谱法 Determination of D-iso HYPERLINK app:ds:ascorbic \t ascorbic HYPERLINK app:ds:acid \t acid in food High-performance of liquid chromatography(送审稿) DBS22/002 —2012 DBS22 吉林省食品安全地方标准 ICS 65.120 B 46 备案号： DBS22 —2012 PAGE I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009和GB/T 20001.4-2001 给出的规则起草。本标准在参阅了国内外文献资料的基础上，采用液相色谱法，根据抗坏血酸和异抗坏血酸的液相色谱保留规律，用HILIC色谱柱分离食品中的D-异抗坏血酸，紫外检测器外标法定量。 本标准由吉林省质量技术监督局提出并归口。 本标准由吉林省产品质量监督检验院负责起草。 本标准主要起草人：李刚、闫林等。 PAGE 4 食品中D-异抗坏血酸的测定 高效液相色谱法 范围 本标准规定了食品中D-异抗坏血酸的测定 高效液相色谱法。 本标准适用于食品中D-异抗坏血酸的测定。 本标准方法检出限为0.5 mg/kg。 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 6682　分析实验室用水规格和试验方法 方法原理 试样中D-异抗坏血酸用溶剂提取，经0.45 μm一次性微孔滤膜过滤后，液相色谱法直接进样，HILIC色谱柱分离，紫外检测器检测，外标法定量。 试剂和材料 除特殊说明外，本标准所用试剂均为分析纯，水为三级水，色谱用水为一级水，符合GB/T 6682中用水规定。 乙腈（色谱纯） 磷酸 D-异抗坏血酸(含量99.7 %)。 乙腈 0.1 %磷酸水溶液：吸取磷酸1 mL，加一级水定容至1000 mL。 流动相：精密吸取0.1 %磷酸水溶液100 mL，加色谱纯乙腈定容至1000 mL。 0.45 μm一次性微孔滤膜，有机相。 仪器设备 液相色谱仪：配紫外检测器。 HILIC色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm，100? 电子分析天平：感量0.1 mg。 匀浆机。 离心机，4000 r/min。 试样的制备6.1 液体试样：准确称取试样5 g，精确至0.001 g，置于50 mL容量瓶中，加流动相适量，混匀后，加流动相定容至刻度。充分振荡混匀后，取此试样溶液适量，用0.45 μm一次性微孔滤膜过滤至2 mL进样瓶中，待测。6.2 水溶性固体试样：准确称取试样5 g，精确至0.001 g，置于50 mL容量瓶中，加适量0.1 %磷酸水溶液至试样溶解，充分振荡，加流动相定容至刻度。此试样溶液充分振荡混匀后，用0.45 μm一次性微孔滤膜过滤至2 mL进样瓶中，待测。6.3 蔬菜、水果及其罐头制品：取有代表性的部分匀浆后，称取试样12.5 g，精确至0.001 g，置于50 mL容量瓶中，加0.1 %磷酸水溶液定容至刻度，此试液在4000 r/min下离心10 min。精密量取上清液10 mL，置于25 mL容量瓶中，加流动相定容至刻度。此试样溶液充分振荡混匀后，用0.45 μm一次性微孔滤膜过滤至2 mL进样瓶中，待测。6.4 水不溶性固体试样：准确称取试样12.5 g，精确至0.001 g，置于250 mL烧杯中，精确加入0.1 %磷酸水溶液50 mL，匀浆后，在4000 r/min下离心10 min。取上清液10 mL，置于25 mL容量瓶中，加流动相定容至刻度。此试样溶液充分振荡混匀后，用0.45 μm一次性微孔滤膜过滤至 分析步骤 条件 检验过程应在避光条件下快速进行。 D-异抗坏血酸标准溶液的制备（应现配现用） 精密称取D-异抗坏血酸标准品100 mg于100 mL棕色容量瓶中，加0.1 %磷酸水溶液定容至刻度，得D-异抗坏血酸浓度为1 mg/mL的标准溶液；精密吸取D-异抗坏血酸标准溶液1mL、2 mL、5 mL、10 mL、20 mL于100 mL棕色容量瓶中，加0.1 %磷酸水溶液稀释并定容至刻度，得浓度为10 μg/mL、2