《乳及乳制品中免疫球蛋白IgG的测定(高效液相色谱法)》(征求意见稿).pdf
ICS:67.100.10T/SSFS
中国标准文献分类号:X16
团体标准
T/SSFS0001—XXXX
乳及乳制品中免疫球蛋白IgG的测定
高效液相色谱法
(征求意见稿)
DeterminationofIgGinmilkanddairyproducts-Liquid
chromatographymethod
20XX-XX-XX发布20XX-XX-XX实施
上海市食品学会发布
T/SSFS0002-20XX
乳及乳制品中免疫球蛋白IgG的测定
高效液相色谱法
1范围
本文件规定了乳及乳制品中免疫球蛋白IgG的高效液相色谱测定方法。
本文件适用于液态乳、乳制品及有乳蛋白来源的固体饮料。
2原理
根据亲和色谱和凝胶过滤色谱的原理,在磷酸盐缓冲液条件下免疫球蛋白IgG与ProteinG配基结合,
在pH3.0冰乙酸溶液条件下洗脱免疫球蛋白IgG,通过高效液相色谱进行分析,外标法定量。
3试剂和材料
注:除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。
3.1试剂
3.1.1氢氧化钠(NaOH)。
3.1.2甘氨酸盐酸盐(CHNO·HCl)。
252
3.1.3盐酸(HCl)。
3.1.4氯化钠(NaCl)。
3.1.5冰乙酸(CHCOOH)。
3
3.1.6磷酸二氢钠(NaHPO):优级纯。
24
3.1.7磷酸氢二钠(NaHPO):优级纯。
24
3.2试剂配制
1
T/SSFS0002-20XX
3.2.1淋洗液(0.05mol/LpH6.5磷酸盐缓冲溶液):称取4.11g磷酸二氢钠,2.23g磷酸氢二钠,
加水800mL溶解并定容至1L,使用1moL/L氢氧化钠调整pH至6.5,摇匀过膜备用。
3.2.2洗脱液(pH3.0冰乙酸溶液):准确吸取3mL冰乙酸定容至1L水中,再使用1moL/L氢氧化
钠调pH至3.0,摇匀过膜备用。
3.2.3流动相:称取0.91g磷酸二氢钠,1.76g磷酸氢二钠,8.77g氯化钠,加水800mL溶解,用1moL/L
氢氧化钠溶液调pH至7.0,定容至1L,摇匀过膜备用。
3.3标准品
免疫球蛋白IgG,纯度≥95%。
3.4标准溶液的配制
3.4.1免疫球蛋白IgG标准储备液(1.0mg/mL):准确称取10.0mg免疫球蛋白IgG标准物质于10mL
容量瓶中,用洗脱液(3.2.2)溶解并定容,-20保存,有效期15天。
3.4.2免疫球蛋白IgG系列标准工作溶液:准确移取储备液(3.4.1)0.05mL、0.10mL、0.20mL、
0.50mL、1.0mL并用洗脱液(3.2.2)定容至1mL,配制成免疫球蛋白IgG浓度分别为50.