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人HMGB1基因原核表达载体的构建与表达的中期报告 人HMGB1基因是一种高迁移性组蛋白结合蛋白。该基因在生物学研究中得到广泛的应用，因为它在许多重要的生物过程中发挥了重要的角色。本研究的目的是构建一个原核表达载体，以便高效地表达人HMGB1基因，并进一步研究其功能。 首先，我们从ATCC中购买了人HMGB1基因的插入片段，并使用PCR扩增技术将其克隆到pET-28a (+) 原核表达载体的多克隆位点上。然后，我们通过限制性内切酶酶切鉴定了构建的原核表达载体，并进行了DNA测序确保插入片段的正确性和连接的完整性。 接下来，我们将构建的原核表达载体转化到大肠杆菌（E.coli）压缩菌中，在含有适当抗生素的培养基上进行选择性培养。从单克隆菌落中分离出宿主菌含有目标表达蛋白的重组菌株，并验证其表达蛋白纯度及含量。 Western blotting结果显示，表达的人HMGB1蛋白具有较高的纯度，且其分子量符合理论值，表明我们成功地构建了一个可用于人HMGB1蛋白表达的原核表达载体。 到目前为止，我们已经成功地构建了一个可用于表达人HMGB1蛋白的原核表达载体，并获得了重组菌株。下一步，我们将进一步优化表达条件，并进行对表达蛋白的功能研究。