mChIL18mChIFNα融合蛋白基因克隆及其原核表达载体的构建.pdf

农业生物技术学报 Journal ofAgriculturalBiotechnology 2007,15 (3): 388~392  ·研究论文 · 融合基 因 克隆及其原核表达载体的构建 *  1.2 1.2 ** 1 1 1 3  陈红英  ，崔保安  ，李新生  ，夏平安  ，王学斌  ，方忠意  (1. 450002 . 450002 河南农业大学牧 医工程学院， 郑州 ； 河南省动物性食品安全重点实验室 ， 郑州 ； ２ 3.河南省兽药监察所 ， 郑州 450002)  摘要：分别 以鸡白细胞介素 18成熟肽基 因(  )和鸡 ­ 干扰素成熟肽基 因(  )为模板 ， 通过 PCR 及 PCR 重 琢   叠延伸技术(SOE)得到融合基 因 。将融合基 因克 隆于 pGEM­T Easy 载体后 ， 再亚克 隆到原核表达载体 pQE30， 并进行测序。测序结果表 明获得了阅读框完整、 连接部位正确的融合基因 。SDS­PAGE 可检测到 ， 。 分子质量为 39.4kD 的重组蛋白 Westernblot证实该重组蛋 白可与兔抗鸡 IL­18血清发生特异性反应 ： 18 ­ (SOE) 关键词 鸡 白细胞介素 ； 鸡 琢  干扰素； 融合基因； 重叠延伸技术 ； 原核表达 中图分类号: S188  文献标识码:A  文章编号:1006­1304(2007)03­0388­05  Fusion Gene Cloningof Chicken Interleukin­18and Chicken Interferon­alpha  andConstruction ofIts ProkaryoticExpression Vector*  1.2 1.2  1 1 1 3  CHEN Hong­ying  CUIBao­an  ** LIXin­sheng  XIAPing­an  WANGXue­bin  FANGZhong­yi  ， ， ， ，