奶牛主要过敏原β-乳球蛋白基因的克隆及其原核表达载体的.PDF

·998 · Journal of Tropical Medicine Vol．9 No．9 Sep．2009 文章编号 （ ） [ ] 1672-3619 2009 09-0998-04 实验研究论著 · · 奶牛主要过敏原 乳球蛋白基因的克隆 β－ 及其原核表达载体的构建 * 邬玉兰 刘志刚 陈小文 ， ， 深圳大学过敏反应与免疫学研究所 深圳 （ ， 518060 ） 摘要 目的 克隆奶牛主要过敏原 乳球蛋白 基因及其原核表达载体的构建 方法 克 【 】 β－ （BLG ） 。 RT-PCR 隆奶牛主要过敏原 的全长基因 根据序列设计带有酶切位点的特异性引物 扩增奶牛 基因的完整开 ， ， BLG BLG 放阅读框 与 载体连接 构建原核表达载体 结果 克隆了奶牛主要过敏原 基因 且构建了其原核 ， pET-28a ， 。 BLG ， 表达载体 该基因含有长度为 的开放阅读框 编码 个氨基酸 该蛋白质的相对分子质量为 等 。 537 bp ， 178 。 19 883 ， 电点为5．14 （GenBank 数据库中的登录号为 EU883598 ）。 序列同源性分析发现其与数据库中已知的 BLG 基因同 源性很高 结论 成功克隆了奶牛主要过敏原 基因及其原核表达载体的构建 为进一步奶牛主要过敏原 。 BLG ， BLG 的重组表达和免疫活性鉴定等奠定基础。 关键词 奶牛 过敏原 乳球蛋白 原核表达载体 【 】 ； ； β－ （BLG ）； 中图分类号：