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hEGF慢病毒载体的构建及基因表达的中期报告.docx

发布:2023-09-20约小于1千字共1页下载文档
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hEGF慢病毒载体的构建及基因表达的中期报告 经过几个月的实验,我们成功地构建了一个hEGF慢病毒载体,并且进行了基因表达的中期检测。 首先,我们选择了适合慢病毒转染的293T细胞,并通过多轮病毒感染和荧光显微镜观察,确定了最适合的感染浓度和感染时间。然后,我们采用PCR扩增和限制酶切连接的方法,将hEGF基因和绿色荧光蛋白(GFP)标记基因插入到慢病毒载体中。经过酶切鉴定和测序确认,我们证实了构建的hEGF慢病毒载体的正确性。 随后,我们将hEGF慢病毒载体转染到293T细胞中,并进行了基因表达的中期检测。通过ELISA检测和Western blotting分析,我们证实hEGF蛋白表达存在,表达量与病毒MOI的浓度呈正相关关系,表达峰值出现在72小时之后。此外,通过荧光显微镜观察,我们也发现GFP标记基因成功地被表达。 综上所述,我们构建的hEGF慢病毒载体已经成功地表达出了hEGF和GFP标记基因,并且表达峰值出现在72小时之后。目前,我们正在进行更高效的病毒制备和纯化,以及进一步的功能研究。
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