毛细管电泳导论.pdf
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毛细管电泳法.ppt
3.分离度第23页，共54页，星期日，2025年，2月5日四、影响分离效率的因素—区带展宽1.纵向扩散的影响在CE中，纵向扩散引起的峰展宽：σ2=2Dt由扩散系数和迁移时间决定。大分子的扩散系数小，可获得更高的分离效率。2.进样的影响当进样塞长度太大时，引起的峰展宽大于纵向扩散。分离效率明显下降；理想情况下，进样塞长度：Winj=(24Dt)1/2实际操作时进样塞长度小于或等于毛细管总长度的1%～2%。第24页，共54页，星期日，2025年，2月5日3.焦耳热与温度梯度的影响电泳过程产生的焦耳热可由下式计算：?m：电解质溶液的摩尔电导；I：工作电流：cm：电解质浓度；散热过程中，在毛细管内形成
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2毛细管电泳2研.ppt
高效毛细管电泳分析 High Performance Capillary Electrophoresis (HPCE) 一、概述 Generalization 二、经典电泳分析法 Traditional electrophoresis 三、高效毛细管电泳分析法 High performance capillary electrophoresis 一 .概述 生物化学家蒂塞利乌斯 A.W.K.蒂塞利乌斯 Arne Wilhelm Kaurin Tiselius (1902－1971） 二.经典电泳分析 三.高效毛细管电泳分析 高效毛细管电泳的特点 一、HPCE基本原理 Basic
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6-毛细管电泳.ppt
* （四）毛细管电泳法 以高压电场为驱动力，以毛细管为分离通道，依据样品中各组分之间的淌度和分配行为的差异而实现分离的一种液相分离技术。 特点——分离效率高、分析速度快、分离模式多、直接分析水溶液。 1.概述 (1)基本概念 ①电泳——带电质点(离子或胶粒)在电解质溶液中在电场作用下,向荷电相反电极的迁移现象。 带电质点的电荷数量、电荷符号与质点大小的差别→迁移速度不同→分离。 ②电泳法——利用电泳现象进行定性、定量的分离分析方法。 ③毛细管电泳法(CE)——在毛细管中进行的电泳法。 又称高效毛细管电泳法(HPCE)。 ④电泳速度
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6-毛细管电泳.ppt
* （四）毛细管电泳法 以高压电场为驱动力，以毛细管为分离通道，依据样品中各组分之间的淌度和分配行为的差异而实现分离的一种液相分离技术。 特点——分离效率高、分析速度快、分离模式多、直接分析水溶液。 1.概述 (1)基本概念 ①电泳——带电质点(离子或胶粒)在电解质溶液中在电场作用下,向荷电相反电极的迁移现象。 带电质点的电荷数量、电荷符号与质点大小的差别→迁移速度不同→分离。 ②电泳法——利用电泳现象进行定性、定量的分离分析方法。 ③毛细管电泳法(CE)——在毛细管中进行的电泳法。 又称高效毛细管电泳法(HPCE)。 ④电泳速度
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毛细管区带电泳.ppt
毛细管区带电泳;;毛细管区带电泳的定义;毛细管区带电泳的别离原理;区带电泳的操作条件;缓冲溶液的选择应遵循的要求：
〔1〕在所选的pH范围内有适宜的缓冲容量。
〔2〕本底的响应值低。
〔3〕自身的淌度要低，离子大而带电小。
硼酸盐、三羟甲基氨基甲烷等缓冲溶液，因缓冲容量大，背景干扰小，经常被作为缓冲溶液使用。
缓冲溶液的pH决定了弱电离试样的有效淌度，同时控制着电渗流的大小和方向，一般通过实验来优化最正确pH值。;添加剂的种类及作用;4.外表活性剂
外表活性剂具有增溶，吸附形成胶束的功能。低浓度的阳离子外表活性剂，能在毛细管壁形成单层或者双层吸附，改变电渗流的大小甚至方向。必须说明的是，参加的
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2015毛细管电泳.ppt
* 表面活性剂选择时应考虑以下因素： （1）经济易得 （2）水溶性好 （3）紫外吸收背景越低越好 （4）不与样品发生破坏性作用 （5）所形成的胶束足够稳定 * 三、环糊精修饰毛细管电泳法 将适量环糊精及其衍生物加入缓冲溶液作为添加剂而进行的毛细管电泳。 分离手型异构 体常用的方法。 环糊精，吡喃葡萄糖单元构成锥筒形结构。待分离组分的分子大小，相对极性，与CD环镶嵌关系决定手性分子的表观淌度。 * 四、毛细管电色谱（CEC） 以微填充柱作为分离柱，以电渗流（电渗+液压）驱动流动相完成色谱分离过程。 基于组分的分配系数和电泳淌度及的差异实现组分的分离。 * CEC中，固定相的选择主要依据HPL
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高效毛细管电泳.ppt
*3.缓冲液池化学惰性，机械稳定性好；4.检测器要求：具有极高灵敏度，可柱端检测；检测器、数据采集与计算机数据处理一体化；类型检测限/mol特点紫外-可见10-13～10-15加二极管阵列，光谱信息荧光10-15～10-17灵敏度高，样品需衍生激光诱导荧光10-18～10-20灵敏度极高，样品需衍生电导10-18～10-19离子灵敏，需专用的装置；第30页，共44页，星期日，2025年，2月5日*3.2、毛细管电泳的进样方式
injectionmethodofHPCE进样量：毛细管长度的1%-2%；纳升级、非常小；1.流体力学进样方式（1）进样端加压（2）出口端抽真空（3）虹吸进样第31页，共
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21-毛细管电泳.ppt
目前应用最广泛的检测器 测量通过溶液后的紫外或可见光光强度的损失 吸光度与样品浓度呈线性关系 在被测物的最大吸收波长处检测时灵敏度最大 1. 紫外检测器(UVD) 朗伯—比尔定律 高灵敏度，高选择性 对多环芳烃，维生素B，黄曲霉素，卟啉类化合物，农药，药物，氨基酸，甾类化合物等有响应。 定量关系： 3. 荧光检测器(FD) 4、安培检测器(ECD) 适用于：氧化还原活性的物质，如：胺、酚、羰基、巯基化合物 原理：电极施加恒电位，当电活性成分经过时，发生氧化还原反应，产生电流。 流速一定时， 与流动相中的浓度有关。 特点：灵敏度高，适合痕量物质检测 5、蒸发光散射检测器
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毛细管电泳法优点.ppt
咖啡因的简介 性质描述 检测方法 碘量法 HPLC 法 近红外光谱分析法 毛细管电泳法 碘量法 HPLC 法 ＨＰＬＣ法测定步骤 首先确定色谱条件，包括色谱柱的选择，流动相、流速、检测波长、柱温及进样量Ｓ等。 近红外光谱分析法 基本原理： 采用近红外光谱分析技术对咖啡因进行了光谱及定量分析 , 原始光谱表明咖啡因在近红外波段有着很强且较为明显的吸收峰。通过对样品的漫反射原始吸光度光谱进行导数、散射校正及相关分析更清晰地给出了咖啡因在近红外光谱波段的光谱特性 , 为建立快速稳健的定标模型创造了
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毛细管电泳答题.ppt
第17章 毛细管电泳 electrophoresis 20世纪30－40年代 蒂塞利乌斯 (A.W.K.Tiselius）建立了移动界面电泳，将电泳发展成分离技术 获得1948年诺贝尔化学奖 毛细管电泳 毛细管电泳的原理 1 装置 毛细管 数据处理 电极 检测器
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Chapter 9-毛细管电泳法.pdf
仪器分析 Instrumental Analysis
毛细管电泳法
Capillary Electrophoresis (CE)
Column
Instrumental Analysis CE
O
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毛细管电泳课件.ppt
毛細管電泳
(CaillaryElectrophoresis,CE)
毛細管電泳是帶電粒子在電場力的驅動下，在毛細管中按其淌度或分配係數不同進行高效、快速分離的電泳新技術，也稱為高效毛細管電泳。20世紀30－40年代蒂塞利烏斯（A.W.K.Tiselius）建立了移動介面電泳，將電泳發展成分離技術獲得1948年諾貝爾化學獎毛細管電泳
(CaillaryElectrophoresis,CE)
1981年J.W.Jorgenson,K.D.Lukacs實驗上和理論上為毛細管電泳的發展奠定了基礎。上一世紀後二十年分析化學領域中發展最迅速的分離分析方法。毛細管電泳
(CaillaryElectroph
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第 六节 毛细管电泳 徐1.pptx
;;5.1 毛细管电泳的基本原理;电泳（electrophoresis): 在电解质溶液中，位于电场中的带电离子在电场力的作用下，以不同的速度向其所带电荷相反的电极方向迁移的现象，称之为电泳。由于不同离子所带电荷及性质的不同，迁移速率不同可实现分离。; 1937年，Tiselius(瑞典)将蛋白质混合液放在两段缓冲溶液之间，两端施以电压进行自由溶液电泳，第一次将人血清提取的蛋白质混合液分离出白蛋白和α、β、γ球蛋白。;经典电泳分析;例如：聚丙烯酰胺凝胶电泳; 传统电泳分析：操作烦琐，分离效率低，定量困难，无法与其他分析方法相比。
1981年，Jorgenson和L
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毛细管电泳的应用.ppt
高效毛细管电泳的应用 1、毛细管电泳的定义 2、几种毛细管电泳的分离原理 3、毛细管电泳的基本配置 4、毛细管电泳的应用领域 一、毛细管电泳的定义 电泳：电解质中带电粒子在电场 作用下，以不同的速度向电荷相 反方向迁移的现象。 传统电泳会在电解质离子流中产 生自热，引起径向粘度和速度的 梯度，从而导致区带展宽、降低 效率。 毛细管电泳是在散热效率极高的、空 芯的、微小内径（10-200μm的毛细 管内进行的大、小分子高效分离技术。 毛细管电泳的主要优点： 1、高灵敏度 2、高分辨
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毛细管电泳详解.docx
1基础理论双电层Zeta 电势淌度2分类3特点4仪器系统5分离因素缓冲液pH值分离电压温度添加剂进样6结合常数7质谱联用8微全分析9应用综述药物制剂分析药物杂质检查中药分析手性药物分析生物样本一、基础理论1.1 电层 电层是指两相之间的分离表面由相对固定和游离的两部分离子组成的。双电层是与表面异号的离子层，凡是浸没在液体中的界面都会产生双电层。在毛细管电泳中，无论是带电粒子的表面还是毛细管管壁的表面都有双电层。1.2 Zeta 电势电介质溶液中，任何带电粒子都可被看成是一个双电层系统的一部分，离子自身的电荷被异号的带电离子中和这些异号离子中有一些被不可逆的吸附到离子上