Chapter 9-毛细管电泳法.pdf

仪器分析 Instrumental Analysis 毛细管电泳法 Capillary Electrophoresis (CE) Column Instrumental Analysis CE Outline • 电泳基本原理（Principle of Electrophoresis） • 高效毛细管电泳（High Performance Capillary Electrophoresis, HPCE） • 电渗流迁移率（Electroosmotic Flow） • 影响分离因素（Effects on Separation） • 胶束电动毛细管色谱（Micellar Electrokinetic Capillary chromatography） 3 Instrumental Analysis CE 电泳基本原理  带电粒子在电场作用下作定向运动的现象（向相反电 极移动）  The separation is based upon the mobility of charged molecules under the influence of an electric field 4 Instrumental Analysis CE 电泳基本原理  在一定pH条件下，每一种分子都具有特定的电荷 （种 类和数量）、大小和形状，在一定时间内它们在相同 电场中泳动速度不同，各自集中到特定的位置上而形 成紧密的泳动带。  带电粒子可以用电泳技术进行分离、分析和鉴定 +  粒子大小：颗粒直径愈小愈快  粒子的电荷：电荷愈多愈快  粒子的形状：愈接近球形愈快 - 5 迁移率 Instrumental Analysis CE 电泳技术的特点  带电粒子在电场的作用下向着与其电性相反的电极方向迁移  许多重要生物分子都具有可电离基团  利用在电场作用下，由于待分离样品中各种分子带电性质以 及分子本身大小、形状等性质的差异，使带电分子产生不同的 迁移速度，从而对样品进行分离、鉴定或提纯 6 往复式高压恒流泵 Instrumental Analysis CE 电泳的分类 按电泳原理可分为二类：  自由界面电泳 （Moving-boun