托盘根中总多酚提取工艺及抗氧化活性研究.docx

背景介绍

托盘为悬钩子属植物山楂叶悬钩子，也称牛叠肚，在我国境内分布广泛。其果实和根可作药用，托盘果实酸甜，可生食，是制备果酱和果酒的常用原料。托盘根富含三萜、多酚、黄酮、多糖等多种活性成分，现代药理研究表明，托盘根具有保肝、抗肿瘤、抗氧化等生物活性。目前，关于托盘根有效成分的研究多集中于皂苷和多糖的提取及提取液的生物活性，如文献报道托盘根的粗提物能有效抑制人乳腺癌细胞（MCF-7）株增殖，托盘根水煎剂能通过抑制α-葡萄糖苷酶发挥降糖作用，其乙醇提取物可对D-半乳糖所致的小鼠衰老模型的衰老指标有很好的改善作用。本文以托盘根为研究对象，通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）清除能力实验、羟自由基清除实验对托盘根总多酚的抗氧化能力进行评价，为托盘根活性成分的挖掘及其资源的综合开发利用提供参考。

文章亮点

1.托盘活性成分的最佳提取工艺为乙醇浓度60%、超声温度80?℃、超声时间50min、料液比1:40g/mL，在此条件下托盘根总多酚提取率为26.16%。

2.?托盘根提取物对DPPH自由基和羟基自由基清除的IC50值分别为0.0069、0.346mg/mL，超声辅助乙醇提取得到的托盘根总多酚具有较强的体外抗氧化活性。

内容简介

1??实验部分

1.1??主要仪器和试剂

1.2??实验方法

1.2.1??标准曲线的制备

1.2.2??托盘根总多酚的制备及含量测定

1.2.3??单因素实验

1.2.4??正交试验设计

在单因素实验结果的基础上，以总多酚的提取率为评价指标，以乙醇浓度、提取温度、提取时间、料液比为考察因素进行4因素3水平的正交试验，确定托盘根中总多酚的最佳提取工艺条件。因素水平设计见表1。

1.2.5??抗氧化实验

2?结果和讨论

2.1??单因素实验结果

2.1.1??乙醇浓度对托盘根总多酚提取率的影响

不同浓度的乙醇溶液对托盘中总多酚提取率的影响如图1所示。

2.1.2??提取温度对托盘根总多酚提取率的影响

不同提取温度对托盘根中总多酚提取率的影响如图2所示。

2.1.3??提取时间对托盘提取效果的影响

不同提取时间对托盘根中总多酚提取率的影响如图3所示。

2.1.4??料液比对托盘根总多酚提取率的影响

不同料液比对托盘根中总多酚提取率的影响如图4所示。

2.2??正交试验结果

在单因素试验结果的基础上，按照表1的因素水平进行L9(34)正交试验，正交设计及结果见表2。

2.3??最佳提取工艺验证结果

根据正交试验优化的最优工艺参数，进行3组平行试验，得到的托盘根总多酚含量分别为25.79%、26.41%和26.28%，其平均值为26.16%，相对标准偏差RSD为1.25%，证明该优化后的工艺条件稳定且稳定性较好。

2.4??抗氧化实验结果分析

2.4.1??托盘根总多酚对DPPH自由基清除能力的测定

托盘根总多酚和抗坏血酸对DPPH自由基的清除能力见图5。

2.4.2??托盘根总多酚对羟基自由基清除能力的测定

托盘根总多酚和抗坏血酸对羟基自由基的清除能力见图6。

3?结论

本文以悬钩子属植物托盘的根为研究对象，采用超声辅助乙醇提取法，以乙醇浓度、超声时间、超声温度及料液比为考察因素，通过单因素实验结合正交设计，确定了托盘根中总多酚的最佳提取工艺参数，分别为乙醇浓度60%，提取温度80?℃，提取时间50min，料液比1:40g/mL。在此最佳条件下，托盘根总多酚提取率为26.16%。杨秀东等[8]等通过溶剂萃取法对托盘根中的活性成分含量进行了研究，其中正丁醇萃取物总酚酸含量为6.18%。唐红梅等[19]等通过回流法提取托盘叶片中的黄酮成分，其得率为9.51%。白子凡等[20]等通过加热回流法对托盘果进行提取，其中总黄酮含量为13.61%、总酚酸含量为8.98%。Kim等[21]等对韩国12个地区的托盘果中活性成分进行含量测定，其中总多酚含量最高为38.5%，总黄酮含量最高为19.7%。通过与文献对比分析，托盘根和果实中总多酚含量高于叶片的含量，其产地对活性成分含量具有一定的影响，且超声辅助乙醇提取法能够有效地提高托盘根中多酚的提起率。

托盘根提取物对DPPH自由基和羟基自由基清除的IC50值分别为0.0069和0.346mg/mL，超声辅助乙醇提取得到的托盘根总多酚具有较强的体外抗氧化活性。目前对托盘的研究主要集中于托盘的栽培技术和托盘的糖类成分研究，而对多酚成分的研究较为匮乏，通过本文的研究为托盘的生物活性挖掘及植物资源的综合开发利用提供了一定的理论基础。