第六章 微生物的生长及控制.ppt

连续培养的优缺点 优点 高效 自控 产品质量稳定 节约动力、人力、水和蒸汽等 缺点 菌种容易退化 容易污染杂菌 营养物的利用率低于单批培养 微生物的高密度培养 指微生物在液体培养中细胞群体密度超过常规培养10倍以上的生长状态或培养技术； 目前由于研究的微生物种类主要局限于E.coli and S.cerevisiae 等兼性厌氧菌； 第四节 微生物培养方法概论 厌氧菌的氧毒害机制 厌氧菌体内无SOD(超氧化物歧化酶)，因此受生物体内普遍存在的超氧阴离子自由基的毒害作用。 去除·O2-等有害活性氧分子的机制 H2O+1/2O2 2H2O 2·O2-+2H+ H2O2+O2 SOD 一切好氧生物 及耐氧菌 过氧化氢酶 一切好氧生物 NADH2 NAD 过氧化物酶 耐氧菌 三、 pH值 嗜碱微生物（basophile） 多数放线菌、硝化细菌、根瘤菌等 耐碱微生物（basotolerant microorganism） 若干链霉菌 嗜酸微生物（acidophile） 多数真菌 耐酸微生物(acidotolerant microorganism) 乳酸杆菌、醋酸杆菌，许多肠杆菌等 微生物培养方法 生产实践 实验室培养法 固体培养 好氧菌的培养 厌氧菌的培养 液体培养 好氧菌的培养 厌氧菌的培养 固体培养 好氧菌的培养 厌氧菌的培养 液体培养 好氧菌的培养 厌氧菌的培养 1、好氧菌的实验室培养 固体培养 试管斜面 培养皿琼脂平板 液体培养 试管液体培养 三角瓶浅层液体培养 摇瓶培养（振荡培养） 台式发酵罐培养 2、厌氧菌的实验室培养 高层琼脂柱 Hungate 滚管 厌氧罐技术 厌氧手套箱 第五节 有害微生物的控制 一、 几个基本概念 1、灭菌 (sterilization) 采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。例如各种高温灭菌措施等。 总菌数 活菌数 细胞数的对数 细胞数的对数 时间 时间 杀菌 溶菌 2、消毒 (disinfection) 消毒是一种采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌，而对被消毒的物体基本无害的措施。 举例： 一些常用的对皮肤、水果、饮用水进行药剂消毒的方法； 对啤酒、牛奶、果汁和酱油等进行消毒处理的巴氏消毒法等； 3、防腐(antisepsis) 防腐就是利用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖，从而达到防止食品等发生霉腐的措施。 防腐的常用措施 低温 缺氧 干燥 高渗 高酸度 防腐剂 4、化学治疗 (chemotherapy) 它是利用具有高度选择毒力（selective toxicity，即对病原菌具有高度毒力而对宿主无显著毒性）的化学物质来抑制宿主体内病原微生物的生长繁殖，借以达到治疗该传染病的一种措施。 用于化疗目的的化学物质称化学治疗剂； 一些重要的化学治疗剂种类： 各种抗生素 磺胺类药物 中草药中的有效成分等 70%酒精消毒，巴氏消毒法 杀死或抑制 物体表面的病原菌 理、化因素 消毒 冷藏、干燥、糖渍、盐腌、缺氧、防腐剂 抑制或杀死 物体内外的一切微生物 理、化因素 防腐 实例 作用效果 处理对象 处理因素 比较项目 抗生素、磺胺药、生物药物素 加压蒸汽灭菌，辐射灭菌，杀菌剂 抑制或杀死 彻底杀灭 宿主体内的病原菌 任何物体内外的一切微生物 化学治疗剂 强理、化因素 化疗 灭菌 灭菌、消毒、防腐和化疗的比较 （一）物理方法——高温杀菌 高温 灭菌 干热灭菌法 火焰灼烧法 烘箱内热空气灭菌法 湿热灭菌 (消毒)法 常压下 加压下 巴氏消毒法 煮沸消毒法 间歇灭菌法 常规加压灭菌法 连续加压灭菌法 LTH法 HTST法 烘箱内热空气灭菌法 150~170℃ 1~2h 彻底杀灭细菌； 适用于金属和玻璃器皿的灭菌； 火焰灼烧法 仅适用于接种环、接种针的灭菌或带病原菌的材料、动物尸体的烧毁等。 干热灭菌法 1、热蒸汽对细胞成分的破坏作用更强； 2、热蒸汽比热空气穿透力更强； 3、蒸汽存在潜热，当气体转变成液体时可放出大量热量； 4、可迅速提高灭菌物体的温度。 相同温度下，湿热灭菌比干热灭菌好； 湿热灭菌法 80% 20% 3 h 2 h 2 h 2 h 90 ℃ 相对湿度 2 min 2 min 2 min 2 min 葡萄球菌 伤寒杆菌 痢疾杆菌 白喉棒杆菌 比较项目 8 h 3 h 3 h 24 h 干热90 ℃ 干热与湿热空气对不同细胞的致死时间 巴氏消毒法 一种低温湿热消毒法。 低温维持法(Low temperature holding method, LTH) 63℃ 30min 高温瞬时法(High temperature short time, HT