一种人神经丝轻链的原核表达载体构建及蛋白的纯化方法.pdf

Exendin-4Tβ4融合蛋白原核表达载体的构建、表达及其纯化的开题报告.docx Exendin-4Tβ4融合蛋白原核表达载体的构建、表达及其纯化的开题报告一、选题依据：随着生物技术的发展，越来越多的融合蛋白被构建和应用于生物医学和工业生产领域。Exendin-4Tβ4融合蛋白具有治疗糖尿病和愈合创伤的潜力，因此对其构建、表达和纯化进行研究具有重要意义。二、研究内容：本研究的主要内容包括： 1.设计Exendin-4Tβ4融合蛋白的基因序列，构建原核表达载体。 2.将构建好的重组质粒转化到大肠杆菌中，进行表达。 3.对表达产物进行纯化的优化研究，找到最优的纯化条件。 4.对获得的纯化产物进行生化特性分析，包括分子量、活性和稳定性等方面的研究。三、研究意义： Exe

2024-05-08 约小于1千字 2页立即下载

IER5原核表达载体的构建及融合蛋白表达、纯化的开题报告.pdf IER5原核表达载体的构建及融合蛋白表达、纯化的 开题报告一、选取载体根据研究需求以及现有实验室资源，我选择了pET-28a(+)作为IER5 原核表达载体。 pET-28a(+)是一种广泛使用的原核表达载体，其中包含T7启动子、 His-Tag序列等功能区域，可以快速、高效地表达目标蛋白，并通过His- Tag序列方便地进行纯化。二、构建IER5表达载体 1.模板DNA提取采取血细胞培养液中提取RNA的方法，利用RNA的反转录酶AMV 进行反转录，将反转录产物提取出来测序鉴定，验证序列准确性。 2.IER5基因克隆根据IER5cDNA序列设计引物，进行PCR扩增，将PCR产物与 p

2024-10-28 约小于1千字 2页立即下载

Vγ9Vδ2融合片段原核表达载体的构建和蛋白纯化的开题报告.pdf Vγ9Vδ2融合片段原核表达载体的构建和蛋白纯化 的开题报告一、研究背景和意义 γδT细胞是具有识别和攻击多种病原体的一类重要淋巴细胞，其中以Vγ9Vδ2T细胞最为常见和活跃。研究表明，Vγ9Vδ2T细胞可以通过其特异性受体识别膜磷酸异构酶A（PAteribacter actinomycetemcomitans），延迟病毒、结核杆菌和多种癌细胞等不同种类的靶细胞，在体内和体外发挥抗病毒、抗肿瘤等免疫监视作用。因此，V γ9Vδ2T细胞的研究对于理解免疫过程和抗病、抗肿瘤治疗有着重要的意义。 Vγ9Vδ2T细胞的特异性识别依赖于其表面上的T细胞受体（TCR）， TCR由表达在T细胞上的

2024-10-03 约1.23千字 2页立即下载

原核表达及纯化方法.doc 原核表达及纯化-His tag 原核表达 挑取一个单菌落（重组表达载体），接种到10mL LB培养基中（注意抗生素抗性）。37℃，过夜摇菌。次日，将菌液接种到1L LB培养基中（1:50~1:100），继续培养至OD600=0.6时（0.6~0.8），加1×IPTG诱导4h。（加IPTG前留样（诱导前全菌蛋白）200μL做SDS）收菌： (1)200μL诱导后全菌； (2)小量表达：收集5mL诱导后全菌，12000g离心1min，裂解沉淀，分别收集上清（可溶性）和沉淀（包涵体）中的蛋白。大量表达：收集1L诱导后全菌，4℃，4500g离心15~30min。可溶性分析目的：重组蛋白是否表

2017-08-13 约4.22千字 7页立即下载

鹅痛风病毒抗原蛋白原核表达载体的构建.docx PAGE 8 PAGE 8 题目：鹅痛风病毒抗原蛋白原核表达载体的构建 目录摘要 (1) 引言(1) 材料与方法(2) 材料(2) 菌种与质粒(2) 常用培养基及试剂(2) 主要仪器及设备(2) 方法(2) 引物设计与合成(2) 基因组RNA的提取与反转录(2) 目的DNA片段的PCR扩增(2) 目的基因与pET-43.1a质粒的双酶酶切(3) 重组表达载体的构建与鉴定(3) 结果与分析(5) ORF2基因片段的扩增(5) 目的DNA与pET-43.1a质粒的双酶切(6) 重组表达质粒的菌液PCR鉴定(6) 重组表达质粒的双酶切鉴定(6) 讨论(7) 4　小结(8)

2022-12-27 约7.69千字 10页立即下载

mChIL18mChIFNα融合蛋白基因克隆及其原核表达载体的构建.pdf 农业生物技术学报 Journal ofAgriculturalBiotechnology 2007,15 (3): 388~392 ·研究论文 · 融合基因克隆及其原核表达载体的构建 *

2015-08-19 约2.74万字 5页立即下载

犬瘟热核衣壳蛋白原核表达及蛋白纯化.docx 毕业设计（论文） PAGE 1- 毕业设计（论文）报告题目：犬瘟热核衣壳蛋白原核表达及蛋白纯化 学号：姓名：学院：专业：指导教师：起止日期：犬瘟热核衣壳蛋白原核表达及蛋白纯化 摘要：犬瘟热（CanineDistemperVirus,CDV）是一种高度传染性病毒，对犬类造成严重危害。CDV核衣壳蛋白（NCP）是病毒颗粒的主要结构蛋白，对病毒的生命周期和致病性至关重要。本研究旨在通过原核表达系统表达CDVNCP，并对其进行纯化，以期为CDV疫苗和诊断试剂的研发提供基础。本研究首先通过PCR技术从CDV病毒中扩增出NCP基因，并将其克隆到原核表达载体pET-28a中。通过IPTG诱导

2025-03-06 约1万字 19页立即下载

人源抗-抗GBM抗体单链抗体scFv3原核载体的构建、表达和纯化的开题报告.docx 人源抗-抗GBM抗体单链抗体scFv3原核载体的构建、表达和纯化的开题报告一、研究背景和意义恶性脑胶质瘤（GBM）是一种高度侵袭性的肿瘤，具有高度恶性、难治性和易复发的特点。目前的治疗方法主要包括手术切除、放疗和化疗，但存在着治疗效果不佳、副作用大等问题，患者的生存时间也很低。因此，开发新型治疗方案对于提高患者的存活率具有重要的意义。近年来，单克隆抗体已成为肿瘤治疗领域中极具潜力的治疗手段。抗体可针对肿瘤细胞表面特异性抗原，通过调节免疫系统和诱导肿瘤细胞凋亡等机制来达到治疗目的。然而，完整抗体有较大的分子量和复杂的结构，限制了其在肿瘤治疗中的应用。而单链抗体（scFv）是由两个不同的抗体

2024-01-16 约1.08千字 2页立即下载

原核表达及蛋白质的纯化.doc 原核表达及蛋白质的纯化与浓度测定之一原核表达 实验材料 1.大肠杆菌BL21.DH5a 2.高盐LB：蛋白胨10g，酵母浸出物5g，NacL10g（低盐LB为5g），溶于双蒸水，然后定容至1000ml中，121.6℃高压灭菌25min-30min后备用 3.LB固体培养基：按上述方法配制的液体培养基，每100ml加1.5g琼脂粉，高压灭菌25min-30min，待培养基温度降至常温左右时（一般为不烫手即可），在无菌状态加入抗生素（3g/200ml）并铺平板，冷却凝固后放入4℃备用 4.IPTG（异丙基硫代-β-D-半乳糖苷在8ml蒸馏水中溶解2g IPTG后，用蒸馏水定容至10ml，用0.2

2017-12-08 约9.73千字 16页立即下载

蛋白原核表达与纯化-(新生培训）.pptx MolecularMicrobiologyFoodSafetyLaboratory 蛋白的原核表达与纯化策略 ZHEJIANGUNIVERSITY ChengCY2012-11-10 PartⅠ蛋白的原核表达 PartⅡ蛋白纯化 PartⅠ蛋白的原核表达 1 原核表达概述 2 原核表达策略选择 3 表达结果检测 4 常见问题与实验例大肠杆菌(Escherichiacoli) 最通用的原核表达系统遗传背景清楚，基因工程操作方便，商品化表达载体种类齐全，表达效率高；基本不分泌，易形成包涵体(缺乏正确折叠的蛋白结构)，无蛋白加工等修饰；常见的原核表达载体： pET 系列 (T7 promo

2024-04-07 约5.71千字 41页立即下载

G250抗原肽与HBcAg融合基因原核表达载体的构建及表达蛋白的免疫分析的开.pdf G250抗原肽与HBcAg融合基因原核表达载体的构建及表达蛋白的免疫分析的开题报告 1.课题背景乙型肝炎是由乙型肝炎病毒（HBV）引起的疾病，全球范围内有数十亿人感染HBV，其中约有3500万人患有慢性乙型肝炎，严重威胁人类健康。目前，已有多种乙型肝炎疫苗上市，但是疫苗的免疫效果和保护持续时间仍存在不足。 G250抗原（CAIX）是一种膜质型酸性脱氧核糖核酸酶（DNase）, 在肿瘤细胞特异性表达。研究发现G250抗原表达于乙型肝炎相关肝癌（HCC）组织中，不仅为HCC的良好标志，而且是HCC细胞识别和免疫细胞识别的一种重要靶点。因此，利用G250抗原肽与HBcAg融合基因原核

2024-11-23 约1.18千字 2页立即下载

大鼠成纤维细胞生长因子21 原核表达载体的构建及蛋白表达条件优化.docx PAGE4 题目大鼠成纤维细胞生长因子21原核表达载体的构建及蛋白表达条件优化原核表达载体的构建及蛋白表达条件优化摘要：目的构建大鼠成纤维细胞生长因子21（fibroblastgrowthfactor21，FGF21）原核表达载体pET32a(+)-FGF21，并对蛋白表达条件进行优化。方法采用重组DNA技术（recombinantDNAtechnology）对大鼠FGF21基因进行扩增、酶切，再与酶切后的pET32a(+)载体连接，构建原核表达载体。将构建的FGF21原核表达载体转化至大肠杆菌感受态细胞，采用正交试验对影响蛋白表达的重要条件（诱导时间

2025-01-22 约2.7万字 42页立即下载

大鼠成纤维细胞生长因子21 原核表达载体的构建及蛋白表达条件优化.docx PAGE4 题目大鼠成纤维细胞生长因子21原核表达载体的构建及蛋白表达条件优化原核表达载体的构建及蛋白表达条件优化摘要：目的构建大鼠成纤维细胞生长因子21（fibroblastgrowthfactor21，FGF21）原核表达载体pET32a(+)-FGF21，并对蛋白表达条件进行优化。方法采用重组DNA技术（recombinantDNAtechnology）对大鼠FGF21基因进行扩增、酶切，再与酶切后的pET32a(+)载体连接，构建原核表达载体。将构建的FGF21原核表达载体转化至大肠杆菌感受态细胞，采用正交试验对影响蛋白表达的重要条件（诱导时间

2025-01-20 约3.3万字 52页立即下载

G250抗原肽与HBcAg融合基因原核表达载体的构建及表达蛋白的免疫分析的中期报告.docx G250抗原肽与HBcAg融合基因原核表达载体的构建及表达蛋白的免疫分析的中期报告本实验旨在构建一个能够表达G250抗原肽和HBcAg融合基因的原核表达载体，并进一步通过蛋白免疫印迹分析表达蛋白的免疫原性。首先，根据G250抗原肽和HBcAg的基因序列，设计合成了相应的引物，通过PCR扩增得到了G250-HBcAg融合基因片段，并将其进行了限制性酶切后用于克隆。经过测序，确认得到了正确的G250-HBcAg融合基因克隆子，并将其亚克隆至pET-32a(+)表达载体中，得到了pET32a-G250-HBcAg重组质粒。接着，将pET32a-G250-HBcAg转化至大肠杆菌 BL21(D

2023-10-06 约小于1千字 1页立即下载

大刺鳅afp2原核表达载体构建.docx 摘要　　[目的]构建大刺鳅抗冻蛋白AFP-2的原核表达载体并对重组蛋白进行纯化及体外抗寒活性进行初步探讨。[方法] 设计原核表达引物，分别在N端、C端引入Nco I和BamH I酶切位点，从实验室保存的菌液pMD18T-AFP-2中扩增不含信号肽的AFP-2片段，双酶切并与相同酶切后的pTWIN1连接，转化到TOP10中，阳性克隆经测序鉴定正确后，提取质粒转化到表达菌株DE3中。诱导表达重组蛋白，纯化后对其抗寒活性进行分析。[结果]成功构建了pTWIN1-AFP-2原核表达载体, 获得纯化AFP-2蛋白，并发现其抗寒活性短时间内效果极佳，但随着时间的推移，抗寒活性降低。关键词：大刺鳅，

2023-09-02 约1.32万字 15页立即下载