7.紫外可见吸收光谱.PDF
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紫外可见吸收光谱法.ppt
增色效应和减色效应最大吸收带的摩尔吸收系数增加时称为增(浓)色效应(Hyperchromiceffect)；最大吸收带的摩尔吸收系数减小时称为减(浅)色效应(Hypochromiceffect)。第31页,共57页，5月，星期六，2024年，5月强带与弱带强带多由允许跃迁产生，是最大摩尔吸收系数εmax≥104L?mol-1?cm-1的吸收带；弱带多由禁阻跃迁产生，是最大摩尔吸收系数εmax103L?mol-1?cm-1的吸收带。第32页,共57页，5月，星期六，2024年，5月谱带类型(1)R带R带是含p-π共轭体系的生色团，如-N=O,-C=O，-N=N-等，发生产生的吸收带。该带的最大吸
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紫外可见吸收光谱法S.ppt
吸光度A的读数范围A=0.20～0.70T=65%～20%根据朗白-比耳定律，可用改变吸收池厚度（b）或待测液的浓度（c）来使吸光度A处在适宜的范围内。5-4分光光度测定方法一、普通分光光度法1.单组分的测定通常比较法或采用A-C标准曲线法定量测定。BlankStandardSampleSample多组分的同时测定**若各组分的吸收曲线互不重叠，则可在各自最大吸收波长处分别进行测定。这本质上与单组分测定没有区别。Aa(λ1)=εabCa求出CaAb(λ2）=εbbCb求出Cb010302价电子的跃迁方式**σ→σ＊跃迁(200nm)如甲烷的λmax为125nm,UV-Vis吸收光谱中用饱和烃类
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（二）双光束分光光度计单色器?同步旋转镜单色器参比样品检测器显示器斩光器光源（三）双波长分光光度计一个光源，两个单色器，一个吸收池光源单色器Ⅰ单色器Ⅱ吸收池检测器?1?2斩光器?1为选好的测定波长，一般为待测物质的?max?2为选好的参比波长，一般为待测物质的?min测得的是样品在两种波长?1和?2处的吸光度之差?A，?A为扣除了背景吸收的吸光度?A=A?1-A?2=（K?1-K?2）CL优点：大大提高了测定准确度，可完全扣除背景可用于微量组分的测定可用于混浊液和多组分混合物的定量测定§3-4紫外可见吸收光谱法的应用不同的有机化合物具有不同的吸收光谱，可进行简单的定性分析，但吸收光谱较简单，只
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3.分子不饱和度的计算定义：不饱和度是指分子结构中达到饱和所缺一价元素的“对”数。如：乙烯变成饱和烷烃需要两个氢原子，不饱和度为1。计算：若分子中仅含一，二，三，四价元素(H，O，N，C)，则可按下式进行不饱和度的计算：?=1+n4+（n3–n1）/2n4，n3，n1分别为分子中四价，三价，一价元素数目。作用：由分子的不饱和度可以推断分子中含有双键，三键，环，芳环的数目，验证谱图解析的正确性。例：C9H8O2?=1+9+（0–8）/2=6第123页,共131页，2024年2月25日，星期天4.解析示例有一化合物C10H16由红外光谱证明有双键和异丙基存在，其紫外光谱?max=231nm（ε90
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（五）信号指示系统它的作用是放大信号并以适当方式指示或记录下来。常用的信号指示装置有直读检流计、电位调节指零装置以及数字显示或自动记录装置等。很多型号的分光光度计装配有微处理机，一方面可对分光光度计进行操作控制，另一方面可进行数据处理。第59页，共115页，星期日，2025年，2月5日二、紫外-可见分光光度计的类型紫外-可见分光光度计的类型很多，但可归纳为三种类型，即单光束分光光度计、双光束分光光度计和双波长分光光度计。1，单光束分光光度计经单色器分光后的一束平行光，轮流通过参比溶液和样品溶液，以进行吸光度的测定。这种简易型分光光度计结构简单，操作方便，维修容易，适用于常规分析。第60页，共1
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紫外可见吸收光谱法.ppt
2.单色器将连续光源中分离出所需要的足够窄波段的光束，直接影响光谱通带，从而影响测定的灵敏度、选择性及标准曲线的线性范围。①入射狭缝：光源的光由此进入单色器；②准光装置：透镜或返射镜，使入射光成为平行光束；③色散元件：棱镜或光栅，将复合光分解成单色光；④聚焦装置：透镜或凹面反射镜，将分光后所得单色光聚焦至出射狭缝；⑤出射狭缝。吸收池：放置各种类型的吸收池（比色皿）和相应的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池两种。在紫外区须采用石英池，可见区一般用玻璃池。检测器：利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号，常用的有光电池、光电管或光电倍增管。结果显示记录系统检流计、数字显示、微机进行仪器自
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增色效应和减色效应最大吸收带的摩尔吸收系数增加时称为增(浓)色效应(Hyperchromiceffect)；最大吸收带的摩尔吸收系数减小时称为减(浅)色效应(Hypochromiceffect)。第31页,共57页，2024年2月25日，星期天强带与弱带强带多由允许跃迁产生，是最大摩尔吸收系数εmax≥104L?mol-1?cm-1的吸收带；弱带多由禁阻跃迁产生，是最大摩尔吸收系数εmax103L?mol-1?cm-1的吸收带。第32页,共57页，2024年2月25日，星期天谱带类型(1)R带R带是含p-π共轭体系的生色团，如-N=O,-C=O，-N=N-等，发生产生的吸收带。该带的最大吸收峰
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1.4.4紫外-可见吸收光谱在化合物结构分析中的应用（1）应用于化合物中微量杂质的检验生物分析中的应用蛋白质含量的经验计算公式：DNA:A280/A260=1.8RNA:A280/A260=2.0工业上的应用不干性油：λmax=210nm干性油：λmax220nm第96页,共113页，2024年2月25日，星期天1.4.4紫外-可见吸收光谱在化合物结构分析中的应用（2）应用于未知化合物的鉴定提供化合物骨架特征和官能团的有用信息，特别是共轭体系在200~800nm内无吸收且ε10，则该化合物不存在共轭体系在210~250nm内有强吸收，则可能含有两个双键的共轭系统在250~300nm内有强吸收，
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紫外及可见吸收光谱法.ppt
*************************************************************************************二、紫外可见分光光度计的类型1.单光束分光光度计单光束分光光度计光路示意如图3-8所示(仪器部件)，经单色器分光后的平行光通过吸收池，进入检测器，进行吸光度的测定。其结构简单，操作方便，适用于常规分析。属于此类光度计的有国产72型、721型、723型、751型和752型等。结构简单，操作方便，维修容易，常规分析。第95页，共106页，星期日，2025年，2月5日*722型分光光度计光学系统图1.光源；2.滤光片；3,8聚光镜4
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紫外可见吸收光谱法 .ppt
比色皿不同厚度的比色皿磨沙面光学玻璃面第30页，共63页，星期日，2025年，2月5日仪器预热第31页，共63页，星期日，2025年，2月5日选取所需波长第32页，共63页，星期日，2025年，2月5日调仪器零点第33页，共63页，星期日，2025年，2月5日将溶液装入比色皿第34页，共63页，星期日，2025年，2月5日擦干比色皿第35页，共63页，星期日，2025年，2月5日将比色皿放入比色皿架第36页，共63页，星期日，2025年，2月5日调参比溶液的透光率为100%第37页，共63页，星期日，2025年，2月5日将待测液推入光路，测定A值。第38页，共63页，星期日，2025年，2月5
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紫外可见吸收光谱法 (4).ppt
2、单色器单色器的作用：使光源发出的光变成所需要波长的单色光。由入射狭缝、准直镜、色散元件、物镜和出射狭缝构成。入射狭缝用于限制杂散光进入单色器，准直镜将入射光束变为平行光束后进入色散元件。后者将复合光分解成单色光，然后通过物镜将出自色散元件的平行光聚焦于出口狭缝。出射狭缝用于限制通带宽度，并将欲测波长的光引出单色器。转动色散元件，可以改变由单色器出射光的波长；调节入射、出射狭缝宽度，可以改变出射光束的通带宽度。第63页,共77页，5月，星期六，2024年，5月第64页,共77页，5月，星期六，2024年，5月3、吸收池（比色皿、比色杯）用于盛放分析试液。石英池用于紫外-可见区的测量，玻璃池只
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紫外可见吸收光谱法 .ppt
感谢大家观看第63页,共63页，2024年2月25日，星期天仪器预热第31页,共63页，2024年2月25日，星期天选取所需波长第32页,共63页，2024年2月25日，星期天调仪器零点第33页,共63页，2024年2月25日，星期天将溶液装入比色皿第34页,共63页，2024年2月25日，星期天擦干比色皿第35页,共63页，2024年2月25日，星期天将比色皿放入比色皿架第36页,共63页，2024年2月25日，星期天调参比溶液的透光率为100%第37页,共63页，2024年2月25日，星期天将待测液推入光路，测定A值。第38页,共63页，2024年2月25日，星期天反应条件无色试液+显色剂
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第2章 紫外可见吸收光谱(全).ppt
* 试剂空白 显色剂或其它试剂有吸收，按显色反应相同的条件，不加样品，同样加入各种试剂和溶剂作为空白溶液，称为试剂空白。如双硫腙测铅。 * 样品空白 样品基体有色，显色剂与样品基体不显色。按显色反应相同的条件，取同样量的样品溶液，不加显色剂，作为空白溶液，称为样品空白。这种空白适用于样品溶液中有吸收干扰的共存组分，且显色剂无吸收的情况。如用硫氰酸盐测钼时，用不加硫氰酸盐的样品溶液作空白，可消除共存Cr3+、Ni3+、Cu2+等有色离子的干扰。 * 平行操作空白 用不含待测组分的样品，在相同条件下，与待测样品同时进行处理，此称为平行操作空白。这种空白常被当作一个样品溶液来处理，所测得
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紫外及可见吸收光谱法.ppt
*************************************************************************************************************************722型分光光度计光学系统图1.光源；2.滤光片；3,8聚光镜4,7.狭缝；5.准直镜；6.光栅9.比色池；10.光电管第96页,共106页，2024年2月25日，星期天*国产751型分光光度计是紫外、可见和近红外分光光度计，适用波长范围为200~1000nm。氢灯和钨灯作为辐射源，分别在200~320nm和320~1000nm范围测量使用．Link第97
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第5章 紫外可见吸收光谱法.doc
第5章 紫外可见吸收光谱法
5.1 内容提要
5.1.1 基本概念
吸光分析法──利用分光光度计测定物质对光的吸收进行分析测定的方法称为吸光分析法或吸光光度法。它包括分子吸光分析法和原子吸光分析法等。
分子吸光分析法──基于物质的分子对光辐射的选择性吸收而建立的分析方法。它包括比色法和分子吸收分光光度法（紫外-可见吸收分光光度法，红外吸收分光光度法）。
比色法──基于比较待测溶液颜色的分子吸光分析法，它分为目视比色法和光电比色法。
目视比色法──通过日光照射待测溶液，用肉眼比较待测溶液与标准溶液颜色的深浅来确定待测物质含量的方法。
光电比色法──利用光电比色计进行测定的比色分析法（用