SN 1303-2003蜂王浆中苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸酯类检验方法 液相色谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1303—2003蜂王浆中苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸酯类检验方法液相色谱法Method for the determination of benzoic acid, sorbic acidand p-hydroxybenzoates in royal jelly--Liquid chromatographic method2003-08-18 发布2004-02-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准蜂王浆中苯甲酸、山梨酸对羟基苯甲酸酯类检验方法液相色谱法SN/T 1303--2003*中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045电话：6852394668517548中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*开本880×12301/16印张1/2字数11千字2003年12月第一版　2003年12月第一次印刷印数 1—2 000*书号：155066·2-15435网址 版权专有侵权必究举报电话：（010SN/T 1303-2003前言本标准的附录 A为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国河南出人境检验检疫局。本标准主要起草人：刘亚风、杨冀州、刘朝晖、梁炜、袁萍。本标准系首次发布的检验检疫行业标准。 SN/T 1303—2003蜂王浆中苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸酯类检验方法液相色谱法1范围本标推规定了蜂王浆中苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯检验的抽样和液相色谱测定方法。本标准适用于蜂王浆中苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯的检验。2 抽样与制样2.1检验批以一报验批为一检验批，每一检验批不多于1 t。一检验批商品应具有相同的特征，如包装、标记、产地、规格、等级等。2.2抽样数量抽样数量见表1。表 1批量/件抽样量/件1～50551~1007100102.3抽样方法按2.2规定的抽样件数随机抽取，逐件开启，从每件内抽取一罐（袋），每罐（袋)取约50g，作为原始样品。2.4制样方法将所取样品充分混匀，分为两等份，加封后，注明标记，一份作为留样保存，另一份作为试样供检验用。在抽样和制样的操作过程中应防止样品受到污染和发生含量的变化。2.5试样保存2.5.1试样宜及时检验。2.5.2在不能及时检验的情况下,应将试样于一18℃以下冷冻保存。3#检验方法3.1方法原理试样中的苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯用乙醇提取，经过离心，取上层清液供液相色谱仪测定，外标法定量。3.2试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为去离子水。3.2.1无水乙醇：优级纯。1 SN/T 1303—-20033.2.2 乙醇:95%。3.2.3甲醇:HPLC纯或优级纯。3.2.4盐酸溶液:0.03 mol/L。3.2.5苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯标准品：99.0%以上。3.2.6苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯标准溶液:每毫升含 1 000 μg。准确称取适量的苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯标准品，分别用无水乙醇(3.2.1)配成1000 μg/mL的标准储备液。根据需要用无水乙醇稀释成适当浓度的混合标准工作溶液。3.3仪器和设备3.3.1液相色谱仪：带可变波长紫外检测器或二极管阵列检测器。3.3.2超声波清洗器。3.3.3离心机。3.4分析步骤3.4.1提取称取试样约2.5g精确至0.01g)于50mL烧杯中，依次加人2mL水，1mL盐酸溶液（3.2.4）,混匀，再加人20mL乙醇（3.2.2），用超声波清洗器提取10min，取出，用乙醇（3.2.2)定容于50mL容量瓶至刻度,摇匀。取适量溶液置于10 mL离心管中，在离心机上以3000 r/min离心10 min，取上层清液用0.45 um的滤膜过滤，供液相色谱仪测定。如样液中被测物质含量过高，可用乙醇稀释到适当的浓度后进行测定。3.4.2色谱条件流动相：A：40%甲醇水溶液;B:甲醇。流动相梯度，见表2。表 2流动相A/(%)流动相 B/(%)时间/min01000~30~70100~303~ 470304~ 流速:2.0 mL/min。检测波长:苯甲酸、山梨酸:230 nm;对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯:248 nm。色谱柱:Radil pak C1