高效液相色谱同时检测蛋白饮料中安赛蜜苯甲酸山梨酸糖精钠脱氢乙酸的前处理方法研究.doc

高效液相色谱同时检测蛋白饮料中安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠、脱氢乙酸前处理方法研究 李玉强，晏晓清（黄冈市产品质量监督检验所，湖北 黄冈 438000） 摘要：建立了二极管阵列─反相高效液相色谱同时快速测定蛋白饮料中安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠、脱氢乙酸五种食品添加剂的检测技术。本文改进的前处理方法操作简便，试验精度和准确度良好，非常适合应用在大量蛋白饮料样品的快速检测工作中。 关键词：高效液相色谱；蛋白饮料；安赛蜜；苯甲酸；山梨酸；糖精钠；脱氢乙酸 The simultaneous determination of acesulfame potassium, benzoic acid, sorbic acid, saccharin sodium and dehydroacetic acid in protein beverages by high performance liquid chromatography and researches of the pretreatment method Li Yu-qiang, Yan Xiao-qing, Yu Hui, Zhang Yan-fang, Cheng Wei-dong (Huanggang Product Quality Supervision and Inspection Institution, Hubei Huanggang 438000) Abstract The detection technology of simultaneous determination of five food additives of acesulfame potassium, benzoic acid, sorbic acid, saccharin sodium and dehydroacetic acid in protein beverages by high performance liquid chromatography with diode array detector was established. The improved pretreatment method with high precision and acccuracy in this dissertation, simple in operation, was singularly appropriate to use in the rapid detections of a large number of protein beverages. Key words high performance liquid chromatography; protein beverages; acesulfame potassium; benzoic acid; sorbic acid; saccharin sodium; dehydroacetic acid 在检测安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠、脱氢乙酸等指标的前处理过程中，需要对提取液进行过滤，而蛋白饮料中蛋白质含量较高，影响过滤效率，是影响上述添加剂快速检测的主要环节。苯甲酸和山梨酸采用亚铁氰化钾和醋酸锌进行蛋白质沉淀[1]，苯甲酸和山梨酸[2,3]。而按照GB/T21703调节pH值后用亚铁氰化钾和醋酸锌蛋白质再用甲醇定容[4]，，。因此有必要针对蛋白饮料的前处理方法进行改进，论证检验方法的实用性，使得数据准确可靠，操作更为简单，便于在基层常规检测工作中推广。 1 材料与方法 1.1 仪器与试剂 1.1.1 仪器 Waters e2695 分离模块，Waters 2998 PDA 检测器，超声清洗器。 1.1.2 试剂 色谱纯甲醇，超纯水，0.5mol/L氢氧化钠，0.42mol/L 硫酸锌，0.02mol/L 乙酸铵，1.00mg/mL苯甲酸、山梨酸、糖精钠（国家标准物质中心），配制250mg/L的安赛蜜储备液和110mg/L的脱氢乙酸储备液（北京上立方联合化工技术研究院）。 1.1.3 色谱条件 色谱柱：TopsilTMC18（250mm×4.6mm×5μm）色谱柱，柱温：30℃，检测波长：230nm，流动相：甲醇:0.02mol/L的乙酸铵（8:92），流速：1.0mL/min，进样体积：20μL。 1.2 前处理方法 称取1g蛋白饮料（精确至0.001g）于50mL比色管中，加入1mL NaOH 溶液，摇匀，加入2mL有机沉淀剂，再分别加入1.5mL ZnSO4溶液、1.5mL NaOH溶液和5mL超纯水，超声处理后用超纯水定容至刻度，混匀，静置5min。上清液过滤（双层滤纸），滤液经0.45μm滤膜过滤后上