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应用双质粒体系提高融合蛋白GGH在毕赤酵母GS115中表达量的初步研究的开题报告
题目:应用双质粒体系提高融合蛋白GGH在毕赤酵母GS115中表达量的初步研究
研究背景与意义:
乳糖酶(GL)和β-半乳糖苷酶(LacB)是重要的蛋白质,可以被广泛应用于乳制品和食品加工业。基于这个需求,GGH(Glycine/Glutamate hybrid gene)被构建出来作为一种新型的融合蛋白,其可以同时具有GL和LacB的双重酶活性。然而,在原核与真核表达系统中都存在很多限制因素,妨碍其在大规模生产中的应用。因此,构建一个高效表达GGH的毕赤酵母GS115的基因工程菌株具有广阔的应用前景。
研究内容:
本文旨在通过应用双质粒体系来提高融合蛋白GGH在毕赤酵母GS115中的表达量。具体研究内容包括:
1. 构建一个能够表达融合蛋白GGH的毕赤酵母GS115基因工程菌株。
2. 在单质体和双质体表达系统中比较不同表达量的GGH,从而确定最佳的表达系统。
3. 通过含有不同浓度MgCl2的诱导培养基对GGH表达进行优化。
预期结果:
1. 成功构建一个高效表达融合蛋白GGH的毕赤酵母GS115基因工程菌株。
2. 通过比较单质体和双质体表达系统,确定最佳的表达系统。
3. 通过优化诱导时的MgCl2浓度来提高融合蛋白GGH的表达量。
研究意义:
该研究将进一步探索双质粒体系提高融合蛋白表达的有效策略,同时为开发高效表达其他需要大量生产的蛋白提供一定的参考。通过本研究,我们可以为乳制品和食品加工业提供更多更好的酶活性蛋白,同时也将对毕赤酵母GS115的提高与完善产生积极的意义。
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