番鸭IFN-α基因的克隆与序列分析.pdf

福建农业学报 26(4)：523～527，201l FujianJournalofAgriculturalSciences 文章编号 ：1。08—0384 (2011)04—523—05 番鸭 IFN-a基因的克隆与序列分析 朱海侠 一，万春和 ，黄 瑜 ，施少华 ，程龙飞 ，傅光华 ，陈红梅 (1．福建省农业科学院畜牧兽医研究所，福建 福州 350013；2．福建农林大学动物科学学院，福建 福州 350002) 摘 要 ：采用 RT—PCR方法从番鸭肺脏器官中扩增 IFN-a基 因片段 ，将扩增产物经胶 回收后克隆到 pMD18一T 载体上，经PCR和双酶切鉴定为阳性后进行序列测定，并用Lasergenev7．1DNAStar软件对测序结果进行分析。 结果表明，所扩增 的 IFN- 基 因编码完整 的开放 阅读框 ，基 因长度 为 576bp，为 国内外 首次报道 。并与 GenBank中登录的各品种鸭、鹅 IFN-a基因核苷酸序列进行 同源性 比较分析 ，其同源性分别在 97．0 ～97．7 和 95．5 ～97．7 ；遗传进化分析表明，鸭和鹅 IFN-a基 因在遗传进化上呈各 自独立的分支 ，推测 IFN—a基 因 在不同动物 中有严格 的种属特异性 。 关键词 ：番鸭；a干扰素 ；序列分析 中图分类号 ：Q959．723 文献标识码 ：A CloningandSequenceAnalysisofMuscovyDuck InterferonAlpha ZHU Hai—xia ，W AN Chu—he ，HUANG Yu ，SHIShao—hua ，CHENG Long—fei，FU Guang—hua ，CHEN Hong—mei (1．InstituteofAnimalHusbandryandVeterinaryMedicine，FujianAcademyofAgriculturalScience， Fuzhou，Fujian 350013，China；2．CollegeofAnimalHusbandryandVeterinaryMedicine， FujianAgricultureandForestryUniversity，Fuzhou，Fujian 350002，China) Abstract：Reversetranscription-polymerasechainreaction (RT—PCR)methodwasusedtOamplifiedtheIFN—agene fragmentfrom lungtissueofMuscovyduck，thenclonedtopMD18一T vector，thepositivecloneswereconfirmedby PCR and restriction enzyme digestion，the obtained sequencewere analyzed by the Lasergene v7．1DNAStar software．Theresultsshowedthat，theMuscovyduckIFN—dgeneencodinga576bpopen readingframe (ORF)， whichwasfirstreportedintheworld．Thenucleotidehadhighersimilarityrangingfrom 95．5 tO97．7 among differentgoosespecies，also hadhighersimilarityranging from 97．0 to97．7 among differentduckspecies； however，theducksand geeseIFN— genehadits’ownphylogenticlineage，which means，theIFN—a genehad strictlyspecificity indifferentspecies． Keywords：Muscovyduck；IFN—alpha；Sequenceanalysis 干扰素 (Interferon，IFN)是细胞或机体受到 生