黄牛脂联素基因遗传特性及在大肠杆菌中的表达研究的任务书.docx

黄牛脂联素基因遗传特性及在大肠杆菌中的表达研究的任务书

任务书

题目：黄牛脂联素基因遗传特性及在大肠杆菌中的表达研究

背景：

作为一种肽类激素，脂联素在人体内起着调节脂肪代谢的重要作用。其中，人类脂联素（Leptin）已经得到了广泛的研究和应用，其在体内的表达和调控机制已经有了比较深入的探讨。然而，黄牛是一种重要的家畜品种，其体内的脂联素基因的遗传特性以及表达调控机制却一直没有得到系统性的研究。因此，本次研究旨在分析黄牛脂联素基因的遗传特性，并在大肠杆菌中进行表达，以期对黄牛脂联素的调控机制进行深入研究。

任务：

1.利用PCR技术，从黄牛组织中克隆脂联素基因的cDNA序列，构建黄牛脂联素基因的全长cDNA序列。

2.使用生物信息学技术对黄牛脂联素基因的基本特性进行分析，包括基因结构、编码蛋白质序列特点、进化保守性等。

3.构建含黄牛脂联素基因的表达质粒，并将其转化到大肠杆菌BL21（DE3）细胞中进行表达。利用SDS和Westernblotting技术检测表达产品。

4.通过RT-qPCR和Northernblotting技术，检测不同组织中黄牛脂联素基因的表达量，进一步探究其表达特点及调控机制。

5.利用GST-tagged重组蛋白结合剂和GSH-Sepharose浸提技术，对黄牛脂联素蛋白的纯化进行初步探究。

6.对黄牛脂联素基因的表达调控机制进行初步探究，包括利用构建的差异表达质粒和其他细胞因子的共同作用等。

7.根据实验结果进行数据分析和解释，并提出进一步研究的展望。

要求：

1.理解PCR、生物信息学、蛋白质纯化、RT-qPCR、Northernblotting等技术的基本原理并加以应用。

2.进行实验前要充分理解实验的目的、原理和方法，并认真设计实验流程。

3.根据实验数据进行数据处理和分析，并能够形成严谨的实验结论。

4.注意实验室安全，认真提交实验报告和实验笔记，保持实验设置、设备齐全和整理清洁。