副结核分枝杆菌SOD基因在大肠杆菌中的表达.pdf

中 国 人 兽 共 患 病 学 报 38 Chine se J our nal of Zoono se s 2009 , 25 ( 1) 文章编号 :1002 - 2694 (2009) 0 1 - 0038 - 04 副结核分枝杆菌 SOD 基因在大肠杆菌中的表达 1 1 1 1 2 曾范利 ,胡玉庆 ,刘新宇 ,王春芳 ,姜秀云 摘 　要 : 目的　构建副结核分枝杆菌 SOD 基因的原核表达载体 ,并在大肠杆菌中获得表达 。方法 　以 B am H Ⅰ和 EcoR Ⅰ双酶切 p GEMTSOD 和 p E T28a ( + ) ,并将纯化的 SOD 基因亚克隆至 p E T28a ( + ) 中 ,构建原核表达质粒 p E T28aSOD , ( ) 并将其转化至感受态 E. col i BL 2 1 D E3 中 ,经 IP T G 诱导后 ,进行 SD SPA GE 和 West ern bloting 分析 。结果 　成功地构建出 原核表达质粒 p E T28aSOD ,并表达了约 26 . 5kDa 融合外源蛋白带 ,且具有牛副结核分枝杆菌抗原反应性 。结论 　副结核分 枝杆菌 SOD 基因在大肠杆菌中获得了表达 ,并具有抗原反应性 ,为进一步研究 SOD 作为诊断试剂或亚单位疫苗奠定了基础 。 关键词 :副结核分枝杆菌 ; SOD 基因;原核表达 　　中图分类号 :Q786 , S852 . 6 18 　文献标识码 :A 　　 Expression of the SOD gene of M ycob act er ium p a r at uber cul osis in E. col i ZEN G Fanli , HU Yuqin g ,L IU Xinyu ,WAN G Chunf an g ,J IAN G Xiuyun ( Col leg e of A ni m al S cience , J i l i n A g ricul t u ral Uni ve rs i ty , Chang ch un 130 118 , Chi na) ABSTRACT :The p urpo se of t hi s st udy i s to con st ruct t he p rokaryotic exp ression p l smid of SOD gene from M y cobacte ri um p a rat uberculos is and to exp ress t hi s gene in E. col i in which . p GEMTSOD and p E T28a ( + ) were digest ed in which double enzymes B am H Ⅰand EcoR Ⅰ. The p rokaryotic exp ression vector p E T28aSOD wa s con st ruct ed by u sing t he p urified SOD gene t hat wa s subcloned into t he exp ression vector p E T28a ( + ) . Pla smid cont aining p E T28aSOD wa s t ran sformed into com p et ence E. col i BL 2 1 (D E3) . The bact erium wa s induced by IP T G and it s ly sat es were loaded dir