鸡AvBD7成熟肽在大肠杆菌中的表达及抗菌活性分析的中期报告.docx

鸡AvBD7成熟肽在大肠杆菌中的表达及抗菌活性分析的中期报告 本研究利用大肠杆菌进行鸡AvBD7成熟肽的表达，并对其抗菌活性进行了分析。 实验分为以下步骤： 1.构建表达载体 利用PCR方法扩增鸡AvBD7成熟肽基因，并插入到大肠杆菌表达载体pET28a中，得到重组表达载体pET28a-AvBD7。 2.转化大肠杆菌 将重组表达载体pET28a-AvBD7转化到大肠杆菌BL21 (DE3)中。 3.诱导表达 在含有适量IPTG诱导剂的LB培养基中培养转化后的大肠杆菌至收获阶段，并利用SDS检测表达产物。 4.纯化重组蛋白 通过Ni-NTA亲和层析纯化重组蛋白并用Western blotting检测纯化效果。 5.测定抗菌活性 采用双层琼脂糖平板法，测试纯化后重组蛋白在不同浓度和pH条件下对革兰氏阳性菌和阴性菌的抗菌活性。 目前研究已完成前四个步骤，通过SDS和Western blotting证实，成功表达和纯化了重组AvBD7成熟肽。下一步将测定其抗菌活性。