第五章 愈伤组织.ppt

愈伤组织培养 （二）培养条件  1．光照  在组织培养中光对器官的作用是一种诱导反应，而不是提供光合作用的能源。除某些植物组织培养要求在黑暗中生长外，一般均需一定的光照条件，满足苗的形成、根的发生、芽分化和体细胞胚形成等分化和形态建成。 一、培养基和培养条件 愈伤组织培养 可以通过调节光强、光照时数及光质来满足对光照条件的需要。 例如对短日照敏感的葡萄品种，其茎切段的组织培养物只有在短日照条件下才能形成根。对于烟草愈伤组织来说，要诱导芽的形成，有效光谱为蓝光，而红光没有效应；但红光对诱导根的形成有效，蓝光则没效。 （二）、培养条件 愈伤组织培养 （二）、培养条件 2．温度  在植物组织培养中， 采用24 ℃ ～28℃的恒温条件进行，对一般植物都可较好地形成芽和根。 而有些植物则需要在一定昼夜温差下培养。如菊芋在白天28℃和夜间15℃的条件下，对根的形成最好。 愈伤组织培养 继代培养物的分化潜力，主要有以下两个因素对其有影响。 1．生理因素 2．遗传因素 二、继代培养物的分化潜力 愈伤组织培养 1．生理因素 在组织培养过程中，逐渐消耗了母体中原有与器官形成有关的特殊物质，而导致继代培养物分化潜力的变化。如胡萝卜组织培养，初代中加入10-6μm的IAA，才能达到最大生长量，但经多次继代培养后，在不加 IAA的培养基上也可达到同样生长量，这说明植物材料内部发生了一些生理生化变化。 不同植物保持分化潜力的时间不同，且差异大。胡萝卜原来培养过程中丧失分化能力的一些组织，加入腺嘌呤、酪蛋白或酵母汁等物质后，器官分化能力可恢复到一定水平。 二、继代培养物的分化潜力 愈伤组织培养 2．遗传因素  愈伤组织长期继代培养会引起其细胞内的染色体发生变化，如出现多倍体、非整倍体、染色体丢失、染色体断裂或重组，致使材料变为混倍组织，而且随着继代培养次数和时间的增加，变化频率也随之增加。愈伤组织继代培养物染色体的不稳定性，对保持供体植物的遗传稳定性是不利的。但对育种来讲，往往可以利用这种变化，从中筛选出具有有利经济性状（如高产、优质、抗病）的细胞系，供育成新品种之用。 二、继代培养物的分化潜力 在继代培养中通常出现染色体紊乱。尤其是器官发生型，继代培养中分化能力丧失与遗传不稳定有关。所以，在进行继代培养时，要尽量利用侧芽增殖或苗的途径，而诱导不定芽发生或胚的发生，则有一定危险性。  愈伤组织培养 二、继代培养物的分化潜力 愈伤组织培养 从外植体形成器官或细胞无性系的形态发生，有以下两种情况： 不定芽和不定根的发生 体细胞胚的发生 第三节 愈伤组织的形态发生 愈伤组织的诱导与分化 愈伤组织的形态发生 愈伤组织培养的应用 愈伤组织的继代培养 愈伤组织培养 第五章 愈伤组织培养 第五章 愈伤组织培养 自然生长的植物受损伤时，在愈合伤口处长出的一团瘤状突起，瘤状突起内的细胞相对于植物体成熟细胞已发生脱分化的变化。 培养中的愈伤组织是指从外植体的内部或切口表面形成的一团没有分化的组织，这种组织具有再分化的能力。 愈伤组织 第五章 愈伤组织培养 愈伤组织培养将母体植株上的各个部分切下作为外值体，接种到无菌的培养基上，进行愈伤组织诱导、生长和发育的一门技术。 一般情况下，植物组织均能诱发形成愈伤组织。 愈伤组织培养 第一节 愈伤组织的诱导与分化 愈伤组织培养 一、愈伤组织的诱导 二、愈伤组织细胞的分化 一、愈伤组织的诱导 愈伤组织培养 植物由细胞构成，细胞是生物结构和生命活动的基本单位，具有全能性，即一个植物细胞能产生一个完整植株的固有能力，或植物细胞具有全套遗传信息，不论是性细胞还是体细胞，在特定环境下能进行表达，而产生一个独立完整的个体。 一、愈伤组织的诱导 愈伤组织培养 愈伤组织诱导条件： 1、离体：摆脱了原来所受到的遗传上的控制和生理上的制约。在一定的培养条件下就会发生一种回复变化，从而失去分化状态变为分生细胞。 2、培养条件：激素的种类和浓度， 2，4－D、NAA、IAA和细胞分裂素等。 3、组织的机械损伤：也作为一种刺激因素诱导细胞开始分裂，愈伤组织往往出现在伤口处。 4、有些天然提取物对愈伤组织的诱导和维持十分有益：常用的有椰子汁（10％），0.5％的酵母提取物，5％～10％的番茄汁。 二、愈伤组织细胞的分化 愈伤组织培养 再分化 ：愈伤组织在一定