《生物化学实验》课程实验大纲 .doc

《生物化学实验》课程实验大纲 编 号：1300760 课程名称：生物化学实验 英文名称：Biochemistry Experiments 实验指导书名称：生物化学实验指导书 学时学分 总学时：30 学分：1 实验时数：30 二、实验目的 生物化学是生物技术及生命科学相关专业的专业基础课程，其实验教学是使学生理解和掌握生物化学基本原理的必需环节。生物化学实验所包含的基本技能涉及生物科学的各个领域，是完成其它专业课程实验的基础，在教学中占有重要地位。本课程的实验目的主要包括： （1）加深生物化学基本概念和基本原理的理解与掌握； （2）培养学生掌握基本生化实验方法和实验技术，掌握各个实验的基本原理； （3）系统训练专门的实验技能，熟练使用各种常用生化实验仪器； （4）训练学生观察实验现象、准确记录实验数据、正确处理与分析实验结果的技能，培养严谨细致的科学作风。 三、实验基本原理 蛋白质的溶解受盐、酸、碱、重金属等因素的影响，发生可逆和不可逆沉淀；在聚丙烯酰胺凝胶电泳中，加入SDS后由于各种蛋白质分子量大小不同，所以蛋白质在电泳中迁移率也会有不同；蛋白质的分子大小不同，小分子蛋白质由于扩散作用进入凝胶颗粒内部而被滞留，大分子被排阻在凝胶颗粒外面而迅速通过层析柱；碱性缓冲液中DNA分子带负电荷，在外加电场作用下向正极泳动；激活剂、抑制剂、温度等对酶促反应速度有极大影响；电子传递过程中的氧化还原反应可通过伴有颜色变化的化合物作受体来研究；纸层析技术可以用于转氨基作用中不同物质的检测。 四、实验基本要求 严格遵守实验室各项规章制度；实验前认真预习实验指导书中有关实验的原理与步骤；认真听取理解教师在实验进行前的重点讲解；分小组进行实验，保持实验室安静，保持实验台整洁有序；正确使用实验仪器；认真观察与分析实验现象，客观真实地填写实验数据并进行结果分析；认真、准确、整洁地撰写实验报告并按时上交。 五、考核与报告 考核分笔试和平时成绩两项。笔试成绩占70%，平时成绩占30%。平时成绩根据整个课程实验过程中学生的各方面表现和实验报告撰写情况打分。 六、主要仪器与设备 组织捣碎机、水浴锅、高速冷冻离心机、台式离心机、柱层析系统、电泳仪、垂直与水平电泳槽、紫外与可见分光光度计、蛋白质检测仪、紫外透射反射仪、冰箱、电子天平、反渗透系统等。 七、实验项目与内容提要 序号 实 验 名 称 内 容 提 要 每组人数 实验学时 实验要求 实验类别 备注 01 蛋白质的沉淀与变性反应 蛋白质的盐溶与盐析， 酸碱、重金属盐、有机酸试剂、加热与蛋白质的不可逆沉淀 2 3 选开 验证 02 醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白 醋酸纤维素薄膜、电泳槽和点样板的准备，染色液与透明液配制，点样与电泳，染色、漂洗、透明化处理与结果观察，绘图 2 4 必开 验证 03 SDS测定蛋白质分子量 安装夹心式垂直板电泳槽，配胶与凝胶板制备，配制电极缓冲液与染色液，电泳、染色、脱色与观察，根据标准蛋白质分子量与迁移率的关系绘制标准曲线，测量样品迁移率并在标准曲线上查出其分子量，绘图 2 4 必开 验证 04 凝胶过滤层析法测定蛋白质分子量 凝胶处理与装柱，上样，洗脱并分部收集洗脱液，分光光度计检测，根据标准蛋白质分子量制作标准曲线，并求出待测样的分子量 2 4 必开 验证 05 DNA琼脂糖凝胶电泳 DNA的酶切，琼脂糖凝胶的制备，加样，水平电泳，紫外下观察，绘图 2 4 必开 验证 06 唾液淀粉酶的性质与活力测定 提取酶蛋白，测定酶对底物的专一性，测定酶活力和比活力，测定底物浓度、激活剂、抑制剂、pH、温度对酶促反应速度的影响 2 8 必开 设计 07 生物氧化与电子传递 心肌提取液的制备，底物的氧化，观察各管颜色变化，结果分析 2 3 选开 验证 08 植物体内的转氨基作用 提取酶液，进行酶促反应，纸层析，烘干后显色，结果分析 2 3 必开 验证 八、适用专业 生物技术专业、生物工程专业、食品科学与工程专业 九、实验地点 合肥工业大学翡翠湖校区5号实验楼201、301室（大学生生化实验基地）