GB/T 9826-1988小麦粉破损淀粉测定法　α-淀粉酶法.pdf

中华人民共和国国家标准 小麦粉破损淀粉测定法 GB/T 9826-88 α-淀 粉 酶 法 Method for determination of starch damage in flour-A lpha-amylase method ─────────────────────────────────────── 1 主题内容与适用范围 本标准规定了用α-淀粉酶测定小麦粉破损淀粉值的原理使用的试剂、仪器、分析的 步骤以及结果计算。 本标准适用于小麦粉破损淀粉值的测定。 2 方法原理 小麦粉中破损淀粉对α-淀粉酶的敏感性大大高于未破损淀粉,在常温下能被α-淀粉 酶降解生成糊精和一定量的还原糖。利用此特性,在规定的条件下,用α－淀粉酶降解小 麦粉中破损淀粉,再用铁氰化钾法测定其还原糖量,并根据法兰德的经验公式计算小麦粉 中的破损淀粉值。 3 试剂 以下试剂未经标明的均为分析纯试剂,水为蒸馏水。 3.1 缓冲溶液 溶解 4.1 g 无水乙酸钠于水中,加入 3mL 冰乙酸,再用水稀释至 1000mL,pH 值应为 4.7 ± 0.1 。 3.2 提取溶液 将 20g 氯化钠及 0.2g 乙酸钙溶于水中,再稀释至 1000mL。 3.3 α-淀粉酶液 称取活性相当于 15000 ±1500 A 的α-淀粉酶制剂溶于 500mL 提取液中,再加入 500mL 缓冲液, α-淀粉酶活性测定见附录 A(补充件) α-淀粉酶活性测定。此溶液用时现配。 3.4 10 ％(V/V)硫酸溶液。 3.5 12 ％钨酸钠溶液。 3.6 0.1M 碱性铁氰化钾溶液 称取 32.9g 干燥纯净的铁氰化钾与 44.0g 无水碳酸钠溶于 1 000mL 水中,贮于棕色瓶避 光 保存。 3.7 乙酸盐溶液 70g 氯化钾和 40g 硫酸锌溶于水中,加入 200mL 冰乙酸,再用水稀释至 1000mL。 3.8 10 ％碘化钾溶液。 3.9 1 ％淀粉溶液。 3.10 0.1M 硫代硫酸钠溶液 称取 24.82g 硫代硫酸钠(含 5 个结晶水)和 3.8g 四硼酸钠溶于 1000mL 水中,贮于棕色瓶 避 光保存,一星期后按 GB 5490 《粮食、油料和植物油脂检验 一般规则》附录 B 规定方法标 定其浓度。 3.11 酸洗石英砂。 4 仪器和用具 4.1 玻璃试管: φ25 ×220mm 。 4.2 量筒:50mL;25mL。 4.3 恒温水浴:可控温 30 ±0.1℃。 4.4 秒表。 4.5 加液器或移液管:2mL;10mL。 4.6 移液管:5mL。 4.7 玻璃漏斗及中速滤纸。 4.8 电炉。 4.9 锥形瓶:100mL。 4.10 滴定管:10mL。 4.11 天平:感量 0.01g;0.1mg 。 4.12 pH 计或精密 pH 试纸:可测 pH4.7 ±0.1 。 5 分析步骤 5.1 称样量 一般小麦粉均假定其水分含量为 14.0％,淀粉含量为 68 ％～72 ％,称样量为 1.00 ± 0.01g 。如果淀粉含量过高或过低时,则称样量应按式(1)计算: 70 称样量(g) ＝──── ………………………………………(1) (95-P-M) 式中:P——100g 试样中蛋白质的克数(含氮量×5.7); M——100g 试样中水分的克数。 5.2 酶解 称取 5.1 规定量的试样于玻璃试管中,加入 1 小勺酸洗石英砂,混匀并将式样摇松倾斜于 试管底部,准确量取 46mL 已预热至30 ℃的α-淀粉酶液,先将少许α-淀粉酶液加入试样中并 尽量摇匀,立即计时,再加入其余α-淀粉酶液,加盖试管并上下颠倒摇动约 30 次使试样均匀 悬浮.迅速将试管浸入 30 ℃水浴中,然后每隔 10min 取出试管,上下颠倒摇动 10 次使试样重新 均匀悬浮,恒温酶解刚好 60min 时,取出试管,立即加入 2mL10 ％硫酸溶液,充分混