大学课件 生物化学 Biochemistry 第1章 蛋白质的结构与功能.ppt

沉降系数（sedimentation coefficient,S) 指单位力场中的沉降速度（1S＝10-13秒）。 沉降系数与物质的分子量的大小、形状、密 度及溶剂的密度高低有关。分子量越大，颗粒越 紧密，沉降系数越大。 三、蛋白质的变性作用 变性作用的概念 在某些物理或化学因素的作用下，蛋白质特定的空间构象被破坏，从而导致其理化性质改变和生物活性丧失，称为蛋白质的变性。 变性的实质 次级键断裂，空间结构破坏 引起变性的因素 物理因素 高温、高压、紫外线、电离辐射、超声波等。 化学因素 强酸、强碱、有机溶剂、尿素、重金属盐等。 变性蛋白质的特点 A.生物学活性丧失 B.溶解度降低，易于沉淀 C.粘度增加 D.结晶能力消失 E.易被蛋白酶水解 蛋白质变性的应用 用75%乙醇、高温、高压和紫外线等消毒杀菌； 临床化验室常用钨酸、三氯乙酸沉淀蛋白质制备无蛋白血滤液， 采用热凝法检查尿蛋白； 低温保存激素、酶、疫苗和免疫血清等蛋白质生物制剂。 牛核糖核酸酶的变性与复性 蛋白质沉淀 概念 蛋白质从溶液中析出的现象称为沉淀。 方法 盐析法、有机溶剂的沉淀、重金属盐沉淀、生物碱试剂沉淀。 变性的蛋白质易于沉淀，但不一定都发生沉淀。沉淀的蛋白质易发生变性，但并不都变性，如盐析。 蛋白质的凝固 加热使蛋白质变性并凝聚成块状称为凝固。 此凝块不溶于强酸或强碱中。凝固实际上是蛋白 质变性后进一步发展的不可逆的结果。因此，凡 凝固的蛋白质一定发生变性。 四、蛋白质的紫外吸收与呈色反应 （一）蛋白质的紫外吸收 蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸残基，具有紫外吸收能力，在280nm处有最大吸收峰。此特性常用于蛋白质含量的测定。 （二）蛋白质的呈色反应 1.双缩脲反应： 凡分子中含有两个或两个以上氨基甲酰基（-CONH2）的化合物都能与碱性铜溶液作用，形成紫红色的复合物，这一反应称为双缩脲反应。 临床化学检验中常用双缩脲法来测定血清总蛋白、血浆纤维蛋白原的含量。 2.酚试剂反应 蛋白质分子中的酪氨酸残基在碱性铜试剂存在下，与酚试剂（磷钨酸和磷钼酸）反应生成蓝色化合物。 临床上常用酚试剂反应来测定血清粘蛋白、脑脊液中的蛋白质等微量蛋白质的含量。 3.染料结合反应 在pHpI环境中，蛋白质分子带正电荷（呈阳离子），能与阴离子染料结合产生颜色反应，其色泽的深浅与蛋白质含量成正比。 临床化学检验中常用染料结合反应来测定血清白蛋白、脑脊液总蛋白的含量。 第五节 蛋白质的分类 05 part 根据其组成成分不同，可分为单纯蛋白质和结合蛋白质两大类。单纯蛋白质只含有氨基酸，而结合蛋白质除含蛋白质部分外，还含有非蛋白质部分。结合蛋白质中的非蛋白质部分称为辅基或辅酶。 根据其形状不同，分为纤维状蛋白质和球状蛋白质两大类。一般来说，纤维状蛋白质形似纤维，其分子长轴的长度比短轴长10倍以上。纤维状蛋白质多数为结构蛋白质 。  1. α-螺旋 α-螺旋的结构特点 ①多肽链以肽键平面为单位，α-碳原子为 转折点，有规律的盘绕成右手螺旋结构。 ②每3.6个氨基酸残基盘绕一圈，螺距为0.54 nm。 ③相邻螺旋的肽键之间形成氢键，方向与长 轴基本平行，维持螺旋的稳定。 ④R基团伸向螺旋外侧，其大小、形状及电荷 性质均影响α-螺旋的形成。 2.β-折叠 β-折叠的结构特点 ①多肽链呈伸展状态，肽键平面沿长轴折叠呈 锯齿状，两平面间夹角为110°，R基交替地伸向锯 齿状结构的上下方。 ②若干肽段互相靠拢，平行排列，通过氢键连 接。氢键的方向与长轴垂直。 ③若两条肽段走向一致（N端、C端方向相同） ，称为顺向平行；反之，称之为逆向平行，逆向更 稳定。  β-折叠包括平行式和反平行式两种类型 3.β-转角 β-转角的特点 ①主链骨架本身以大约180°回折 ②回折部分通常由4个氨基酸残基构成 ③构象依靠第一残基的-CO基与第四残基的- NH 基之间形成氢键来维系。  4.无规卷曲 是指多肽链中除了以上几种比较规则的构象外，其余没有确定规律性的那部分肽链构象。 （二）蛋白质的三级结构 概念 指具有二级结构的多肽链进一步折叠盘曲所形成的空间结构。 一般为球状或椭圆状，并具有一定的生物学活性。 主要化学键