《食品中多种食源性致病菌快速筛查法》标准文本（征求意见稿）.pdf

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GBAS

粤港澳大湾区标准促进会团体标准

T/GBASXXXX—XXXX

食品中多种食源性致病菌快速筛查法

Rapidscreeningmethodforfoodbornepathogensinfood

（征求意见稿）

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

广东省粤港澳大湾区标准促进会  发布

T/GBASXXXX—XXXX

食品中多种食源性致病菌快速筛查法

1范围

本文件规定了食品中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、阪崎克罗诺菌、单核细胞增生李斯特氏菌、大肠

埃希氏菌O157:H7、副溶血性弧菌、创伤弧菌的多重qPCR快速筛查方法。

本文件适用于食品中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、阪崎克罗诺菌、单核细胞增生李斯特氏菌、大肠

埃希氏菌O157:H7、副溶血性弧菌、创伤弧菌的快速筛查。

2规范性引用文件

其中，注日期的引用文件，

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB4789.4食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验；

GB4789.7食品安全国家标准食品微生物学检验副溶血性弧菌检验；

GB4789.10食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验；

GB4789.30食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验；

GB4789.36食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验；

GB4789.40食品安全国家标准食品微生物学检验克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)检验；

GB4789.44食品安全国家标准食品微生物学检验创伤弧菌检验

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

实时荧光PCR法（

Taqman探针法）real-timePCR（

TaqMan，MolecularBeacon）

是在PCR扩增时引入Taqman探针和一对上下游引物对，探针和引物针对食源性致病菌特异性靶位

进行设计，探针为一寡核苷酸：5’端标记一个报告荧光基团，3’端标记一个淬灭荧光基团。PCR扩增

时，Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光检测

系统可接受到荧光信号，而荧光强度与PCR产物的数量呈正相关，通过读取最终结果的Ct值和观察扩增

曲线可以判断是否有目标菌检出。

双重实时荧光PCR法，是在同一PCR反应体系里加上两对引物和两种不同荧光基团标记的探针，同

时检测2种致病菌，达到一次性快速筛查2种食源性致病菌的目的。

4试剂与材料

4.1除另有规定外，试剂为分析纯或生化纯。实验用水应符合GB/T6682中一级水的规格。所有试剂均

用无DNA酶污染的容器分装。

2+

4.2实时荧光PCR法（Taqman探针法）premixmaster预混液（含taqDNA聚合酶，Mg、dNTPs）

4.37种致病菌特异性引物对与探针

4.4DNA提取试剂

4.57种致病菌常规检验方法所需的鉴定试剂材料

5仪器和设备