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DB23_T2374—2019_马铃薯胞囊线虫田间调查技术规范_黑龙江省.docx

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ICS

65.020.01

DB23

B15

黑龙江省地方标准

DB23/T2374—2019

马铃薯胞囊线虫田间调查技术规范

黑龙江省市场监督管理局???发布

DB23/T2374—2019

本标准依据GB/T1.1-2009的规则编写。

本标准由黑龙江省农业农村厅提出。

本标准由黑龙江省农业标准化技术委员会归口。

本标准起草单位:黑龙江省农业科学院马铃薯研究所。

本标准主要起草人:王文重、闵凡祥、胡林双、高云飞、杨帅、魏琪、董学志、郭梅、宿飞飞。

I

DB23/T2374—2019

马铃薯胞囊线虫田间调查技术规程

1范围

本标准规定了马铃薯胞囊线虫田间调查的土壤取样、分离、鉴定和结果判断方法。

本标准适用于马铃薯胞囊线虫田间调查。

2术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

2.1

马铃薯胞囊线虫

马铃薯胞囊线虫(potatocystnematode)包括马铃薯白线虫(Globodera

rostochiensis)和马铃薯金线虫(Globoderapallida),属于线虫门(Nemata)、侧尾腺

纲(Secernentea)、垫刃目(Tylenchida)、异皮线虫科(Heteroderidae)胞囊线虫属

(Heterodera),是马铃薯作物上最重要的病害之一。对马铃薯根部、匍匐茎和块茎造成伤

害,症状主要表现为坏死,影响根部生长,阻碍养分吸收,降低马铃薯产量和商品性。

2

DB23/T2374—2019

取样时先去除3cm~5cm的表土,然后利用土壤取样器采集土壤样品。由于马铃薯属于垄

作,所以取样时取距地面15cm~20cm的根部土壤。采用对角线五点取样法,每个地块可取

5个取样点,每个取样点挖取根围土作为1个小样,每个小样100g,然后将其混合成一个500

g的混合样。写好标签,将样品装入取样袋中。取样时应在土壤湿润时进行,避免在土壤浸

水时取样。

4分离和鉴定

4.1样品分离

将取回的土壤样品平铺在干净的浅瓷盘内,自然干燥,去除土壤中的植物组织和粗砂等

杂质后,称取100g土壤样品备用。

采用胞囊漂浮器分离法,分离时先将漂浮筒注满水,将干燥后的100g土壤样品放在上

筛中,用强水流冲洗至全部土样到漂浮筒内,胞囊和草屑等浮在水面并溢出,经环颈水槽流

到底筛中,用清水反复冲洗底筛,将底筛中的漂浮物倒在铺有滤纸的漏斗中过滤,胞囊留在

滤纸上。将晾干后的滤纸放于解剖镜(8倍~10倍)下检查,寻找胞囊。发现胞囊后用小毛刷

收集胞囊。

4.2样品制作

将胞囊线虫的胞囊在培养皿内浸泡24h,用尖头镊子将浸过的胞囊移至载玻片的水滴中,

在体视显微镜(10倍~90倍)下用解剖刀切下胞囊后部的阴门椎部分。用挑针清除阴门椎内

附着物,用刀适当整理阴门椎边缘,使其高度不超过阴门窗区域宽度的10倍~15倍。将切下

的阴门椎用40%的H2O2处理数分钟,阴门椎依次移至载玻片的另一侧的70%、95%、100%酒精

液中脱水。取适量固体状的中性胶涂至凹槽的载玻片中,在酒精灯上加热至胶溶化,将处理

好的阴门埋于胶内,注意操作时一定摆正阴门椎使其顶端向上,加入刷子毛作支撑物,盖上

盖玻片,贴好标签。

3

DB23/T2374—2019

附录A

(资料性附录)

马铃薯胞囊线虫形态特征

A.1马铃薯白线虫

学名:Globoderarostochiensis

异名:Heteroderaschachtiirostochiensis;H.schachtiisolani;H.

rostochiensis

英文名:Potatocystnematode;Whitepotatocystnematode

分类:线虫动物门(Nematoda),侧尾腺口纲(Secernentea),垫刃目(Tylenchida),

异皮线虫科(Heteroderidae),球胞囊属(Globoder)。

形态学特征:成熟雌虫呈白色,死后变为褐色、有光泽,有些种群在变成褐色之前要经

过3~4周的米黄色阶段。虫体近球形,有一个突出的颈和头部;末端钝圆、无阴门锥,角质

层有网状花纹;头架骨化弱,口针强壮,针锥部长占口针长的1/2,基部球向后倾斜,口腔

内衬形成一个口针导管从头架延伸到约口针长的75%处。中食道球发达,中食道球瓣大、呈

新月形;食道腺叶宽,位置不定,有3个核。排泄孔大,位于颈基部。双生殖腺,阴门横裂、

位于略凹陷的阴门盆内,阴门两边为小瘤状突起形成的新月形区,肛门和阴门盆之间角质层

上约有12条隆起的脊,其中有些交接成网状。胞囊:褐色,有光泽,近球形,有突出的颈;

角质层花纹比雌虫更清晰,角质层下无亚结晶层;阴门区有1个环形

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