刺五加硒多糖的制备及其抗氧化活性研究.pdf
摘要
刺五加是一味补虚药,主要分布在中国东北的森林或灌丛中。研究表明,刺五
加含有多糖、皂苷、多酚等物质。刺五加中的多糖成分也因其具有天然的免疫调节
作用和抗氧化作用,受到人们越来越多的关注。硒是机体必需的微量元素之一,对
于动植物而言更是一种生长必需的元素,可广泛参与到动植物的生命活动中。摄入
适量的硒可以增加抗氧化作用,降低患病风险。在自然环境中,硒以有机和无机的
两种不同形态存在。有机硒化合物在科学研究领域中极具潜力,尤其是硒化多糖通
过其低毒、高活性和易吸收等诸多优势引起了广泛学术界的关注。
将硒与多糖结合使之成为有机硒化合物,它不仅可以保持多糖的基本构型和生
物活性,还能极大提高生物可利用度,降低毒性和不良反应。本研究以刺五加为原
料,制备硒化刺五加多糖和刺五加-多糖纳米硒,并比较其体内、外的抗氧化能力,
为刺五加多糖的深加工、作为药物和功能性保健品提供一定的理论基础。本研究内
容如下:
1.硒化刺五加多糖(SelenizedAcanthopanaxsenticosuspolysaccharide,Se-ASPS)
的制备
以刺五加多糖为研究对象,通过单因素试验探究不同因素对合成硒化刺五加多
糖的影响,采用正交试验优化合成条件,并进行验证试验,检测该合成工艺的稳定
性与准确性。结果表明,最佳合成条件为:亚硒酸钠添加量为600mg,温度为60℃,
反应时间为9h。在此工艺下,硒化刺五加多糖中硒质量分数为145.78mg/g,碳水化
合物含量为69.53%。
2.刺五加多糖-纳米硒复合物(Acanthopanaxsenticosuspolysaccharide-selenium
nanoparticles,ASPS-SeNPs)的制备及成分、表征和活性研究
本试验以刺五加多糖为模板,利用亚硒酸钠可以被抗坏血酸还原的原理,制备
刺五加多糖-纳米硒。采用单因素实验分别对刺五加多糖添加量、反应温度、反应时
间、抗坏血酸和亚硒酸钠的配比这四个因素进行了考察,探究其对制备出的刺五加
多糖纳米硒粒径大小、稳定性的影响。研究结果显示,最优的合成条件为:刺五加
多糖用量为100毫克,反应温度为50摄氏度,反应时间为6小时,抗坏血酸和亚硒酸
iv
钠的配比为4:1。此条件下制备出的刺五加多糖-纳米硒复合物的颗粒更加均匀稳固,
粒度更小。其A410/A490值最大,趋势稳定。
试验测定ASPS(Acanthopanaxsenticosuspolysaccharide,ASPS)、Se-ASPS、
ASPS-SeNPs的蛋白质含量,多糖含量,硒含量,糖醛酸含量和还原糖含量。结果表
明,Se-ASPS、ASPS、ASPS-SeNPs的硒含量分别为145.78、5.336、21.916mg/g;蛋
白质含量分别为1.60%、4.30%、7.91%;多糖含量分别为17.12、11.47、14.29mg/g;
糖醛酸含量分别为2.31%、3.04%、3.50%;还原糖含量分别为49.36%、13.60%、
42.13%。并对ASPS-SeNPs和Se-ASPS进行扫描电镜、热重分析、红外光谱和抗氧化
等研究。结果表明,本试验成功合成刺五加多糖-纳米硒复合物。在体外抗氧化性试
验中,当Se-ASPS、ASPS-SeNPs质量浓度为5mg/mL时,对DPPH自由基、ABTS自
由基清除率分别为88.44%、98.89%和90.11%、98.99%,均强于ASPS。
3.硒化刺五加多糖对D-半乳糖诱导小鼠氧化损伤的保护作用
为探究硒化刺五加多糖(Se-ASPS)对D-半乳糖(D-gal)诱导小鼠氧化损伤的
保护作用。采用D-gal腹腔注射建立小鼠氧化损伤模型,高、中、低剂量组分别添加
硒化刺五加多糖200、100、50mg/kg·bw,连续灌胃小鼠28d。比较各组小鼠的体重
和采食量变化及脏器指数,采用HE染色观察小鼠肝脏病变。使用试剂盒分析血清和
心、肝、脾和肾组织中MDA(丙二醛)、SOD(总氧化物歧化酶)、GSH-Px(谷
胱甘肽过氧化物酶)、CAT(过氧化氢酶)和AST(谷草转氨