绿盲蝽触角均一化全长cDNA文库构建与化学感受蛋白基因发掘研究的中期报告.docx

绿盲蝽触角均一化全长cDNA文库构建与化学感受蛋白基因发掘研究的中期报告 本文报告了绿盲蝽(Hemiptera: Miridae)触角均一化全长cDNA文库构建及化学感受蛋白基因发掘的中期研究进展。为了获得绿盲蝽触角中的全基因表达信息，利用Trizol法抽提总RNA，并利用Oligo (dT) cellulose柱纯化mRNA。通过用针对构建文库的SMART（Switching Mechanism at 5′ end of RNA Template）技术建立一的触角的均一化全长cDNA文库，该文库包含有2.1×106的克隆。初步筛选结果表明，95% 的cDNA片段长度在1.0Kb以上。 将构建好的文库进行初步的序列分析，结果显示其中的一批化学感受蛋白(CSP)基因具有代表性。我们从文库中克隆到了17个CSP基因片段，这些片段分别长度为320 ~ 850 bp，平均长度为532 bp。序列分析和同源比对的结果表明，这些基因片段可能代表了12个不同的CSP基因，其中有两个基因在本研究中首次发现。 本研究中所建立的均一化全长cDNA文库将为绿盲蝽触角的全基因表达提供一个可靠的基因组学工具，并有助于对有关感受生物化学方面的研究，如外源性分子的化学识别及CSP基因所参与的功能等。