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第二十章毛细管电泳(CaillaryElectrophoresis,CE).ppt

发布:2017-03-03约字共41页下载文档
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第22章 毛细管电泳法 Capillary Electrophoresis, CE 毛细管电泳是带电粒子在电场力的驱动下,在毛细管中按其淌度或和分配系数不同进行高效、快速分离的电泳新技术,也称为高效毛细管电泳。 20世纪30-40年代 蒂塞利乌斯 (A.W.K.Tiselius)建立了移动界面电泳,将电泳发展成分离技术 获得1948年诺贝尔化学奖 第22章 毛细管电泳法 (Capillary Electrophoresis, CE) 1 毛细管电泳的原理 2 分离模式 3 进样与检测 4 毛细管电泳的应用 第22章 毛细管电泳 22-1 毛细管电泳的原理 1 装置 毛细管 数据处理 电极 检测器 电极 试样 缓冲液 缓冲液 高压电源 (可高至30KV) 第22章 毛细管电泳 22-1 毛细管电泳的原理 2 电泳和电渗 电泳 是指在电场作用下,溶液中的带电粒子作定向移动的现象。 电渗 是指在电场作用下,毛细管或固相多孔物质内液体沿固体表面移动的现象。 第22章 毛细管电泳 22-1 毛细管电泳的原理 2 电泳和电渗 电泳 行为与特性使用淌度描述 即单位场强(E)下离子的平均电泳速度υ μep=υ/E 实验中,只发生电泳时有效淌度 μef =υef ﹒ (L /V) =( l / tm )﹒(L /V) 毛细管有效长度 迁移时间 毛细管总长度 电压 第22章 毛细管电泳 22-1 毛细管电泳的原理 2 电泳和电渗 电渗 与固液界面的双电层有着密切的关系 在毛细管壁双电层的扩散层中的阳离子,相对于毛细管壁的负电荷表面,形成一个圆筒形的阳离子鞘,在电场作用下,溶剂化了的阳离子,沿滑动面与紧密层作相对运动,携带着溶剂一起向阴极迁移,便形成了电渗流(electroosmotic flow ,EOF)。 第22章 毛细管电泳 22-1 毛细管电泳的原理 2 电泳和电渗 电渗流的流型特点 电渗流 HPLC 塞流 层流 第22章 毛细管电泳 22-1 毛细管电泳的原理 2 电泳和电渗 电渗流的表示 电渗流的大小可用淌度(μeo)或电渗流系数表示 μeo =υeo / E = l /( teo﹒E ) 电渗流速度 毛细管有效长度 电渗流流出时间 电场强度 第22章 毛细管电泳 22-1 毛细管电泳的原理 2 电泳和电渗 电渗流的意义 电泳过程中,伴随着电渗现象 电渗流的速度比电泳速度快5-7倍 利用电渗流可将正、负离子或中性分子一起向同一
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