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实验七聚合酶链式反应PCR技术.pdf

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实验七聚合酶链式反响〔

PCR〕技术

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¡1.实验目的

¡2.实验原理

¡3.实验仪器、材料与试剂

¡4.实验步骤

¡5.实验结果与讨论

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实验目的

¡掌握PCR反响的原理及技术。

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实验原理

¡聚合酶链式反响〔polymerasechainreaction〕简称PCR技术,是一种体外扩增特异

DNA片段的技术。

¡利用PCR技术可在短时间内获得数百万个特异的DNA序列的拷贝。PCR

遗传病的基因诊断等方面得到广泛的应用。

¡PCR技术实际上是在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶

的酶促合成反响。

¡PCR技术的特异性取决于引物和模板DNA结合的特异性。

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PCR:变性-退火-延伸

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PCR

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靶DNA的扩增

靶DNA的扩增

5’3’

5’3’

(a)

(a)

5’3’

引物25’3’

引物2

(b)

(b)3’5’

3’5’引物1

引物1

5’

5’3’

3’

引物2互补链引物1互补链

引物互补链引物互补链

(c)21

(c)

3’5’

3’5’

3’

3’5’

(d)5’

(d)

新引物

新引物

5’3’

5’

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