氮测定法.doc

第  PAGE 4 页 共  NUMPAGES 4 页 杭州康恩贝制药有限公司 编号：STP-CA-036-01 氮测定法 编 订审 核审 定批 准年 月 日年 月 日年 月 日 年 月 日分发质量部（1份）、化验室（1份）执行年 月 日页数共 2 页复制2份目 的：明确氮测定法的标准操作 范 围：氮测定法检查 职 责： QC检验员负责按本标准对样品进行检测复核，对检验结果负责 QC主管负责本标准的起草，对出具的检验报告负责 内 容： 1.简述 1.1氮测定法《中国药典》适用于含氮有机物的含氮量测定。 1.2本法系将供试品在硫酸及催化剂作用下，经强热分解使有机氮转化为硫酸铵，再经强碱碱化使氨馏出并吸收于硼酸液，最后用硫酸滴定液滴定，求出氮含量。简述为消化、蒸馏及滴定三步。 1.3氮测定法分第一步（常量法）与第二法（半微量法），应按该品种项下的规定或具体试验选用。 2.仪器与试药 2.1仪器 2.1.1常量定氮仪由500ml凯氏烧瓶、氮气球和冷凝管组成。 2.1.2半微量定氮仪由1000ml圆底烧瓶、连有氮气球的蒸馏器和直形冷凝管等组成。 2.1.3分析天平：感量为0.1mg的天平，适用于精密称取0.1g以上者；感量为0.01mg的天平，适用于精密称量0.1g以下者。 2.1.4消化应用可调压电炉加热。蒸馏可用可调压电炉或电热套加热。 2.1.5蒸馏连接用的乳胶管或橡胶管，应用氢氧化钠试液煮20min，洗去碱液后用水煮沸，洗净，晾干。 2.2试药 2.2.1试剂均为化学纯。 2.2.2滴定液的配制和标定应符合《中国药典》附录规定。硫酸滴定液（0.005mol/L）用硫酸滴定液（0.05mol/L）定量稀释制成。 2.2.3试液、指示液的配制均符合《中国药典》附录规定。 2.2.4硫酸铜用作消化催化剂；硫酸钾（或无水硫酸钠）用以提高硫酸的沸点，也可将硫酸钾与硫酸铜按10:1比例混合研匀使用。 3.操作方法 3.1第一法（常量法） 3.1.1称样：取供试品适量（约相当于含氮量25-30mg），精密称??，置干燥的500ml凯氏烧瓶中。供试品如为固体或半固体，可用定量滤纸包裹加入，也可直接称入。 3.1.2消化：在凯氏烧瓶中依次加入硫酸钾（或无水硫酸钠）10g和硫酸铜0.5g，再沿瓶壁缓缓加入硫酸20ml；若瓶颈上有少量供试品黏附，可用硫酸冲下（保证样品在硫酸液面以下）。加玻璃珠或沸石2-3粒，在瓶口置一小漏斗并使烧瓶成45°斜置，用可调压电炉缓缓加热，此时烧瓶内物质炭化变黑、溶解；继续使溶液的温度保持在沸点以下，等跑沸停止，消化液由黑色渐变棕色时，强热至沸，待溶液成澄清的绿色后，除另有规定外，继续加热30min，放冷，沿瓶壁缓缓加水250ml，摇匀，放冷。 3.1.3蒸馏：沿瓶壁加40%氢氧化钠溶液75ml，使流至瓶底自成一液层，加锌粒数粒，用氮气球将凯氏烧瓶与冷凝管连接（氮气球可防止碱液溅入硼酸吸收液）。另取2%硼酸溶液50ml，置500ml锥形瓶中，加甲基红-溴甲酚绿指示液10滴，将冷凝管尖端浸入硼酸溶液的液面下；轻轻摇动凯氏烧瓶，摇匀（防止温度骤然变化引起硼酸接收液倒吸），加热蒸馏（蒸馏时不易泡沸过高，以免溅满氮气球），蒸至接收液的总体积约为250ml时，将冷凝管尖端提出液面，使蒸汽冲洗约1min，用水淋洗尖端，停止蒸馏。（蒸馏过程不可突然降低温度，以免硼酸吸收液倒吸。） 3.1.4滴定：馏出液用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定至溶液由蓝绿色变为灰紫色，并将滴定结果用空白试验（空白馏出液的容积应与供试品所得馏出液的容积基本相等）校正。每1ml的硫酸滴定液（0.05mol/L）相当于1.401mg的N。 3.1.5空白试验：照供试品消化、蒸馏、滴定的全过程，以相同条件下做空白试验，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定至相同的终点，其读数用于校正供试品滴定的读数。 3.2第二法（半微量法） 3.2.1称样：取供试品适量（约相当于含氮量1.0-2.0mg），精密称定，置干燥的30-50ml凯氏烧瓶中。供试品如为固体或半固体，可用定量滤纸包裹加入，也可直接称入。 3.2.2消化：在凯氏烧瓶中加入硫酸钾（或无水硫酸钠）0.3g和30%硫酸铜溶液5滴，再沿瓶壁缓缓加入硫酸2.0ml，并加玻璃珠1-2粒，在烧瓶口置一小漏斗，用小火缓缓加