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黄酮类化合物分离纯化的研究进展 摘要:目前，利用现代分离技术提取黄酮类化合物的方法有很多。本文综述提取黄酮类化合物的方法，重点介绍了有机溶剂提取法、超声波辅助提取法、微波提取法、超临界萃取法、酶浸渍萃取法。 关键词：黄酮类；有机溶剂提取法；超声波辅助提取法；微波提取法；超临界萃取法；酶浸渍萃取法 前言 黄酮类化合物（flavonoids）是一类存在于自然界的、具有2-苯基色原酮（flavone）结构的化合物类低分子天然植物成分，又称生物黄酮或植物黄酮，属植物次级代谢产物，广泛存在于各种植物和大型真菌中。黄酮类化合物可以根据结构分：黄酮和黄酮醇；二氢黄酮和二氢黄酮醇；查耳酮；双黄酮；异黄酮和二氢异黄酮；黄酮苷。黄酮类化合物种类多，由于其结构和状态的不同使得溶解度存在着很大的差异。游离的苷元难溶或不溶于水，而易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、等有机溶剂或稀碱溶液，其中有些平面分子，如黄酮、黄酮醇、查耳酮等，分子间排列紧密，引力较大，难溶于水；而非平面型分子，如二氢衍生物，其分子间排列较松弛，引力降低，有利于水分子的进入，较易溶于水。黄酮类化合物的分离纯化工作主要依据以下几个方面：1极性大小不同，利用吸附或分配原理进行分离；2、酸性强弱不同，如梯度pH萃取法；3、分子大小不同，如葡聚糖凝胶分子筛； 4、分子中的某些特殊结构，如利用金属盐络合能力不同等特点进行分离柑橘属类黄酮多以极性较大的糖苷形式存在,目前广泛采用极性较大的有机溶剂进行浸提。对胡柚皮的提取工艺表明,在乙醇浓度90%,料液比1:5,提取2h,提取温度40-60时类黄酮提取率较高。研究化橘红用8倍量80%乙醇回流提取3次,1·5 h/次,得到较大的提取率。研究枳实药材中总黄酮提取工艺,得到60%的乙醇,8倍量,回流提取2次,每次1·5 h。SCDE） 超临界流体萃取是利用超临界流体在临界压力和临界温度附近具有的特殊性能作为溶剂进行萃取的一门科学，最常用的超临界流体为CO2。应用CO2—SPE技术提取分离黄酮类物质，具有萃取速度快，效率高，操作简单等特点，产品中没有残留有机溶剂，与传统的萃取分离工艺相比优势是明显的。此外，超临界CO2萃取易与其它先进技术联用，成为新型而有效的分离分析技术。胡圣尧等[8]用正交试验法确定超临界萃取后紫草籽中黄酮类化合物提取的最佳方案，测定提取的粗黄酮的抗氧化活性及与柠檬酸、Vc的抗氧化协同作用。结果超临界萃取后的紫草籽中黄酮类化合物的最佳提取条件为：乙醇浓度60％、固液比1：5、温度50、提取时间为2h。超临界萃取后的紫草籽粗黄酮对二苯代苦味酰基自由基（DPPH）的EC50为65．47mg／L。50cc萃取40min，含量测定显示，CO2超临界流体萃取法能有效萃取银杏叶中的总黄酮和总内酯，含量高于欧洲(EGb761)的质量标准[20]。 2.5 酶浸渍萃取法 酶浸渍法是近几年根据黄酮类化合物的特性研究出来的一种新的方法。酶浸渍法是指在黄酮提取过程中，通过加入恰当的酶发生转糖反应和酶解反应而使产品黄酮得率和含量大大提高的新兴技术[15]。传统的水提取只能提取水溶性黄酮，致使类黄酮得率和含量过低；此时如选用恰当的酶加入，不仅可以将油溶性的类黄酮转化为易溶于水的糖苷类而利于提取，而且还可通过酶反应将植物组织分解，使提取传质阻力减小；另外也可使提取液中的杂质分解去除，从而简化后续分离纯化工序。并且其提取条件温和，有利于黄酮类活性保护，且成本低、安全。 3 结语 有机溶剂提取法、超声波辅助提取法、微波提取法、超临界萃取法、酶浸渍萃取法，以上介绍的这五种方法是提取黄酮类化合物的主要方法。此外还有高速逆流色谱提取技术、超滤技术、植物细胞膜破碎法、液膜分离法等新型提取技术，都有各自优于传统方法的特点。。超临界萃取法速度快、操作简单，产品无溶剂残留；超声波辅助提取无需加热，对有效成分 具有保护作用。在提取某些中草药黄酮类成分时，可以将二者合理地结合利用[18]。 由于黄酮类化合物具有降压、降血脂、镇痛、抑制血小板聚集、抗骨质舒松、抗心律失常、抗过敏及抗缺氧等多种药理及保健作用[19]，而且黄酮类化合物在人体不能直接合成，只能从食品中获得，现在科学家们都积极关注从植物体中提取纯度高、活性强的天然黄酮成分。因此，对黄酮类化合物的提取以及测定方法的研究具有广泛的前景。 总之，黄酮类化合物的分析方法较多，且日趋成熟，在实际应用中根据不同制剂类型以及不同的分析要求来制定相应的提取分离方法。 参考文献 [1] 张岩，曹国杰，张燕，方国臻，王硕.黄酮类化合物的提取以及检测方法的研究进展[J].食品研究与开发，2008,28（1） [2] 焦士蓉,郑贵菊. 柚皮黄酮类物质的微波辅助提取及其抗氧化活性研究[J]. 食品与机械, 2007(01) [3] 赵永光，赵莹. 超声波法提