大孔吸附树脂分离纯化黄酮类化合物的研究进展.doc

大孔吸附树脂分离纯化黄酮类化合物的研究进展 摘 要: 黄酮类化合物是在植物中分布非常广泛的一类天然产物, 具有多种生物活性。大孔吸附树脂纯化是一项不需复杂设备、操作条件温和的新型分离技术。综述了大孔吸附树脂分离纯化黄酮类化合物的研究进展。 关键词: 黄酮; 大孔吸附树脂; 分离纯化; 进展 正文 1 前言 黄酮类化合物(Flavonoids) 是在植物中分布非常广泛的一类天然产物, 其在植物体内大部分与糖结合成苷类, 也有一部分以游离态(苷元) 形式存在, 对植物的生长、发育、开花、结果及防菌防病等起着重要的作用。黄酮类化合物是许多中草药的有效成分, 具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎、抗病毒、免疫调节、解毒护肝、细胞保护、防治心血管疾病、调节机体内分泌和代谢、影响细胞生长等多种生物活性, 近年来国内外学者对其颇为重视。近十年来, 黄酮类化合物的研究倾向于其药用价值的开发, 更多地涉及提取分离纯化方法、含量测定及制剂研究等。 黄酮类化合物的分离包括黄酮类化合物与非黄酮类化合物的分离、黄酮类化合物中的单体分离。黄酮类化合物与非黄酮类化合物的分离方法主要有提取法、色谱法、超临界萃取法、膜分离法、双水相萃取分离法等;单体分离方法主要是色谱法, 除经典的柱色谱法和薄层色谱法外,还有高效液相色谱法(HPLC)、高速逆流色谱法(HSCCC)等。本文在此仅对大孔吸附树脂分离纯化黄酮类化合物的研究进展进行综述。 2 大孔吸附树脂分离纯化黄酮类化合物 2 1 黄酮类化合物与非黄酮类化合物的分离纯化 大孔吸附树脂于20世纪70年代末逐步应用于中草药有效成分的提取分离。大孔吸附树脂的型号有HP-30、D101、DA-201、AB-8、XAD-4、XAD-16 等, 其特点是吸附容量大、再生简单、效果可靠, 尤其适用于黄酮类、皂苷类等成分的分离纯化及其大规模生产。 李兆龙等用日本产非极性大孔吸附树脂(如Diaion HP-10、HP-20、HP-21) 等分离银杏叶黄酮。银杏叶粗粉经50% ~70% 乙醇提取, 提取液浓缩放冷,析出不需要的成分;滤液用大孔吸附树脂分离, 用水洗柱, 再用60%~70% 乙醇解吸被吸附的提取物,所得提取物用高效液相色谱分析,黄酮类化合物含量超过20%,银杏内酯含量超过5%;如果水洗柱后再用低浓度的乙醇(如5%乙醇)洗柱,再用60%~ 70%乙醇解吸提取物,黄酮苷含量可达24%以上。国产D101树脂也可以用于分离银杏叶黄酮,D101树脂对银杏叶黄酮的吸附量约为2g.mL,产品含总黄酮约为38%(以银杏总黄酮计)。 张黎明等研究出D101 树脂室温下对山楂叶总黄酮动态吸附-脱附较优的工艺参数为: 上柱液pH值4.5~ 5.5、上柱速度2 BV.h、溶液处理量6 BV.次、脱附剂为70%乙醇、脱附剂流速1 BV.h、脱附剂用量2 BV.次。 郑亚杰等以对总黄酮的吸附率、解吸附率及吸附速率为考察指标, 采用D101、DM301、A B-8、SP825大孔吸附树脂对山楂总黄酮进行纯化。结果发现, 4种大孔吸附树脂对山楂总黄酮的静态吸附量大小依次为: D101 \AB-8 DM301 SP825; 解吸附率大小依次为: AB-8 DM301 D101 SP825; 吸附速率大小依次为: AB-8 DM301\D101 SP825; 4 种树脂中,D101、AB-8、DM301 的静态吸附量较大, 1 g 树脂吸附95 mg 以上的总黄酮, 且树脂的解吸附率均在70%以上, AB-8 树脂的吸附与洗脱效果最佳。 Liu 等采用静态与动态的吸附- 解吸两种方法, 利用紫外可见分光光度法测定葛根总黄酮的含量,研究不同大孔吸附树脂及不同的工艺条件对总黄酮分离纯化的影响。结果发现, SP70 树脂分离效果最好,其最佳工艺为: 药液浓度01 5 g . mL(相当于原生药) 、pH 值5~ 6、上样速率2 BV.h, 上样量60BV、以5 BV 的70% 乙醇以2 BV.h的流速洗脱。经SP70 树脂处理后葛根总黄酮的含量可达80% 以上。 陈菁菁等考察了D101、AB-8、N KA-9 大孔吸附树脂对桑叶总黄酮(MTF) 的吸附分离性能, 以饱和吸附量、总黄酮回收率及纯度为考察指标综合评价, 绘制渗漏曲线和洗脱曲线并用数学方程来描述其动力学过程。结果发现, NKA-9 树脂对MTF 的吸附分离性能最好, 饱和吸附量为43.4 mg.g, 洗脱率为98.2%;分离纯化MTF的最优工艺条件为: 上样浓度20 mg .mL、洗脱用水6 BV、70% 乙醇洗脱, 总黄酮纯度达58.2%, 树脂可重复使用4次。 贝伟剑等通过测试AB-8、S-8、HPD100、HPD130、HPD300、HPD400、HPD600、聚酰胺粉(14~ 30目) 对柿叶黄酮的吸附率