MM_FS_CNG_0265畜禽肉中土霉素四环素金霉素残留量测定方法(高效液相色谱法).doc
MM_FS_CNG_0265畜禽肉土霉素四环素金霉素残留量高效液相色谱法
MM_FS_CNG_0265
畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量测定方法(高效液相色谱法)
1.适用范围
本方法适用于各种食用畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量的测定。最低检出浓度为:0.15,0.20,0.65mg/kg。
样品经提取,微孔滤膜过滤后直接进样,用反相色谱分离,紫外检测器检测,与标准比较定量,出峰顺序为土霉素、四环素、金霉素。标准加法定量。
乙腈(分析纯);
0.01mol/L磷酸二氢钠溶液:称取1.56g(±0.01g)磷酸二氢钠(NaH2PH4·2H2μm)过滤,备用;
土霉素(OTC)标准溶液:称取土霉素0.0100g(±0.0001g),用0.1mol/L盐酸溶液每毫升含土霉素1mg;
四环素(TC)标准溶液:称取四环素0.0100g(±0.001g),用0.01mol/L盐酸溶液溶解并定容10.00mL,此溶液每毫升含四环素1mg;
金霉素(CTC)标准溶液:称取金霉素0.0100g(±0.0001g),溶于蒸馏水并定容成10.00mL,此溶液每毫升含金霉素1mg;
℃以下保存,可使用1周;
混合标准溶液:取四环素、四环素标准溶液各1.00mL,取金霉素标准溶液2.00mL,置于10mL容量瓶中,加蒸馏水至刻度。此溶液每毫升含土霉素、四环素各0.1mg,金霉素0.2mg,临时现配;
5%高氯酸溶液。
高效液相色谱仪(HPLC):具紫外检测器。
柱:ODSC18(5μ×15cm;
检测波长:355nm;
灵敏度:0.002AUFS;
柱温:室温;
流速:1.0mL/min;
进样量:10μL;
流动相:乙腈/0.01mol/L磷酸二氢钠溶液(用30%(V/V)硝酸溶液调节pH2.5),35∶65(V/V),使用前用超声波脱气10min。
5.1.样品测定:称取5.00g(±0.01g)切碎的肉样(<5mm),置于50mL锥形烧瓶中,加入5%高氯酸25.0mL,于振荡器上振荡提取10min,移入到离心管中,以2000r/min离心3min,取上清液经0.45μm滤膜过滤,取溶液10μL进样,记录峰高,从工作曲线上查得含量。
5.2.工作曲线:分别称取7份切碎的肉样,每份5.00g(±0.01g),分别加入混合标准溶液0、25、50、100、150、200、250μμμg),按5.1方法操作、以峰高为纵坐标,以抗生素含量为横坐标,绘制工作曲线。
X=
A×1000
m×1000
式中:X——样品中抗生素含量,mg/kg;
A——样品溶液测得抗生素质量,μg;
m——样品质量,g。
6.来源:
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