MM_FS_CNG_0265畜禽肉中土霉素四环素金霉素残留量测定方法（高效液相色谱法）.doc

MM_FS_CNG_0265畜禽肉土霉素四环素金霉素残留量高效液相色谱法

MM_FS_CNG_0265

畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量测定方法（高效液相色谱法）

1.适用范围

本方法适用于各种食用畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量的测定。最低检出浓度为：0.15，0.20，0.65mg／kg。

样品经提取，微孔滤膜过滤后直接进样，用反相色谱分离，紫外检测器检测，与标准比较定量，出峰顺序为土霉素、四环素、金霉素。标准加法定量。

乙腈（分析纯）；

0.01mol／L磷酸二氢钠溶液：称取1.56g（±0.01g）磷酸二氢钠（NaH2PH4·2H2μm）过滤，备用；

土霉素（OTC）标准溶液：称取土霉素0.0100g（±0.0001g），用0.1mol／L盐酸溶液每毫升含土霉素1mg；

四环素（TC）标准溶液：称取四环素0.0100g（±0.001g），用0.01mol／L盐酸溶液溶解并定容10.00mL，此溶液每毫升含四环素1mg；

金霉素（CTC）标准溶液：称取金霉素0.0100g（±0.0001g），溶于蒸馏水并定容成10.00mL，此溶液每毫升含金霉素1mg；

℃以下保存，可使用1周；

混合标准溶液：取四环素、四环素标准溶液各1.00mL，取金霉素标准溶液2.00mL，置于10mL容量瓶中，加蒸馏水至刻度。此溶液每毫升含土霉素、四环素各0.1mg，金霉素0.2mg，临时现配；

5％高氯酸溶液。

高效液相色谱仪（HPLC）：具紫外检测器。

柱：ODSC18（5μ×15cm；

检测波长：355nm；

灵敏度：0.002AUFS；

柱温：室温；

流速：1.0mL／min；

进样量：10μL；

流动相：乙腈／0.01mol／L磷酸二氢钠溶液（用30％（V／V）硝酸溶液调节pH2.5），35∶65（V／V），使用前用超声波脱气10min。

5.1.样品测定：称取5.00g（±0.01g）切碎的肉样（＜5mm），置于50mL锥形烧瓶中，加入5％高氯酸25.0mL，于振荡器上振荡提取10min，移入到离心管中，以2000r／min离心3min，取上清液经0.45μm滤膜过滤，取溶液10μL进样，记录峰高，从工作曲线上查得含量。

5.2.工作曲线：分别称取7份切碎的肉样，每份5.00g（±0.01g），分别加入混合标准溶液0、25、50、100、150、200、250μμμg），按5.1方法操作、以峰高为纵坐标，以抗生素含量为横坐标，绘制工作曲线。

X＝

A×1000

m×1000

式中：X——样品中抗生素含量，mg／kg；

A——样品溶液测得抗生素质量，μg；

m——样品质量，g。

6.来源：

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