人胰岛素样生长因子-1基因的克隆、表达和活性检测.pdf

第篙年孙期 !丝些型型型些—————————』些!!坠!叁!些耋!!坠 羔塞叁! !塑兰些 一 人胰岛素样生长因子．1基因的克隆、表达和活性检测 岳凤鸣z 赵焕英1 杨慧1 高福禄3 徐群渊” fuJJ匕医科大学组织学肝胎学教研窒-石家庄050017 首都医科太学北京神经科学研究所，北京100054；2 3承德医学院，承德007000) [摘要] 目的克隆人胰岛素样牛长吲子I型(blGF-1)，构建真核表达载体Jf进行表达及活性检测，为IGF-I 堆Ⅲ治疗糖尿病堂定基础。 测序lF确后构建表达载体，转染猴肾成纤维细胞系COS-7，用原位朵交和免埴组织化学榆测表达，收集培养上清以 eDNA片段；成功构建r真 胰岛素刺激释放实验进行活性测定。 结果扩增得到710bp带有Kozak序列的IGF一1 结论新构建的载 核表达载体I)CI．。。。／hlGF-1；IGF-1在COS一7细胞得到了表达，并具有刺激胰岛素分泌的活性。 体一1n㈣／hlGFI能在COS一7细胞中表达、分泌，且所分秘的IGF-I具有生物活性。 [关键词]人胰岛素样生长因子I；克隆；表达；牛物活性 [中圈分类号] A[文章编号]0529·1356(2003)03-306 Q578：Q78[文献标识码] OFNEWLY-CLoNEDHUMAN THEEXPRESSIONANDACTIVITY INSULINLIKEGROWTHFACToRGENE Hut。，GAOFu—lu’，xu YUE Qun—yuanl‘ Feng-minf．ZHAOltuan—yin91．YANG 1 ofMedical Be41wlmEtitute如Neurosciea(es，CapitalUniters“7 Scie#m，Be咖100054，ckM and 050017，Chitin 2mⅢⅢofHistologyEmbryology．mkMf，dicalUniwrsit3．ShijmzhMng 3 ChettgdeMedical 067000．拍。肿) College，Chengde roles treatmentof and Inorderlu the ofhlOF一1in diabetesmcllitusdiabetic l Abstract]Objective investigate ofhumaninsulinlike factor I(IGF·1)№clonedandconstructedinto syn(1mmes，thegene gmwth t