胰岛素样生长因子1在病理性瘢痕中表达.doc

胰岛素样生长因子1在病理性瘢痕中表达[摘要] 目的 研究胰岛素样生长因子1（insulin-like growth factor 1，IGF-1）及其受体（IGF-1R)在病理性瘢痕中的表达及其意义，探讨异常瘢痕发生的分子机制。 方法 收集增生性瘢痕、瘢痕疙瘩及正常皮肤标本，RT-PCR检测不同组织中IGF-1、IGF-1R表达，并进行统计学分析。 结果 RT-PCR显示瘢痕疙瘩中IGF-1R明显高于正常皮肤，差异有显著性（P=0.027＜0.05）；IGF-1R在增生性瘢痕中表达为弱阳性，与正常皮肤相比差异无显著性（P = 0.894＞0.05）。增生性瘢痕和瘢痕疙瘩中IGF-1明显高于瘢痕周围正常皮肤，差异有显著性（P 0.05)。 结论 IGF-1及IGF-1R在病理性瘢痕的形成过程中起重要作用。 [关键词] 瘢痕疙瘩；增生性瘢痕；胰岛素样生长因子1受体；胰岛素样生长因子1 [中图分类号] R622 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2012）21-0024-02 病理性瘢痕是以成纤维细胞大量增生、胶原及基质等过度沉积为特征的皮肤结缔组织的纤维化疾病，是临床上常见的增殖性疾病之一，其发病机制尚未完全明了[1，2]。胰岛素样生长因子1（insulin-like growth factor 1，IGF-1）又称生长介素和促生长因子，现有研究证实其与肿瘤等增殖性疾病关系密切[3]。本实验旨在应用实时PCR（real time polymerase chain reaction，RT-PCR）检测IGF-1及其受体（IGF-1R）在瘢痕疙瘩、增生性瘢痕以及正常皮肤中的表达，观测IGF-1与IGF-1R在病理性瘢痕中表达的差异，探讨IGF-1与病理性瘢痕的关系。 1 资料与方法 1.1 资料 本实验中所有组织标本均采自2007年1月～2009年3月中山大学附属第一医院烧伤科、整形科住院病人的手术切除组织。纳入标准：临床确诊的增生性瘢痕、瘢痕疙瘩和成熟瘢痕，签署临床研究的知情同意书。剔除标准：①瘢痕表面有皮肤破损、炎症；②瘢痕局部接受外用药物、注射药物和放射等治疗；③增生性瘢痕术后无剩余正常皮肤（10 mg）作对照；④有糖尿病、周围血管病、肿瘤及增殖性疾病史；⑤伴有严重心、肝、肾等脏器功能不全及重度营养不良。共纳入18例，其中男9例，女9例。年龄18～48岁，平均23.3岁。 本实验组织标本根据临床诊断及病理学诊断[1，2]分类：①增生性瘢痕6例，位于烧伤创面愈合后3～6个月的四肢、躯干及面颈部瘢痕，瘢痕突出邻近正常皮肤0.3～1.2 cm，充血明显，质地硬实，无弹性，表面无破溃，有痛痒症状，病理切片结果为增生性瘢痕；②正常皮肤6例，取自身体邻近增生性瘢痕的正常全层皮肤；③瘢痕疙瘩6例，4例为前胸部烧伤创面愈合后形成的瘢痕疙瘩，2例为穿耳环后形成的耳垂瘢痕疙瘩。受伤时间1～3年。瘢痕突出邻近正常皮肤0.5～2 cm并侵袭周围正常皮肤，充血明显，质地坚硬，无弹性，表面无破溃，病理切片结果为瘢痕疙瘩；④成熟瘢痕6例，受伤后5年以上四肢瘢痕，瘢痕色白或接近正常皮肤，质软，有弹性，无痛痒，表皮完整，病理切片结果为成熟瘢痕组织。24份组织标本共取自18例患者。 1.2 方法 所有组织标本于术后常规送病理切片检查，剩余组织标本置于含有胎牛血清（20％)和二甲基亚砜（10％)的缓冲液中-80 ℃超低温冰箱冻存，封口、编号并标记日期，备RT-PCR使用。 所有组织标本经病理学证实取材正确后，分为4组，对照组为正常皮肤组，实验组为增生性瘢痕组、瘢痕疙瘩组和成熟瘢痕组，每组6份标本。利用RT-PCR检测各组标本中IGF-1含量。RT-PCR程序按说明书进行，主要包括引物探针设计合成、组织总RNA的提取、逆转录反应、荧光定量PCR反应。按我们既往报道的方法进行[4]。 1.3 统计学方法 利用SPSS16.0统计软件，以“最小值～最大值（中位数）”表示数据，对各实验组中IGF-1含量进行方差齐性检验。 2 结果 方差同质性Levene检验结果为P=0.006，说明方差不齐，进行非参数检验，取用Kruskal-Wallis H检验。Kruskal-Wallis H检验结果为渐近显著性，（Asymp.Sig.）=0.022 0.05，可以得出结论，四组组间的IGF-1含量是不同的，瘢痕疙瘩、增生性瘢痕的IGF-1含量高于正常皮肤。见表1。 表1 Kruskal Wallis H检验 3 讨论 本研究中所有病理性瘢痕组织标本选择除了依靠病史、体格检查等诊断外，还对本研究中所有组织标本进行病理组织学检测（于中山大学附属第一医院病理科及外科实验室完成），剔除接受过局部外用药物