EASYspin 纤维类组织RNA快速提取试剂盒使用说明书.pdf

- 1 - EASYspin 纤维类组织 RNA快速提取试剂盒 目录号：HXR44 目录编号 包装单位 HXR4401 20次 HXR4402 50次 ? 适用范围： 适用于快速提取心脏、骨骼肌、血管、气管、皮肤和其它纤维丰富的组织RNA ? 试剂盒组成、储存、稳定性： 试剂盒组成 保存 20次 50次 裂解液 RLT 室温 20ml 50 ml 去蛋白液 RW1 室温 15 ml 40 ml 漂洗液 RW 室温 5 ml 10ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇 RNase-free H2O 室温 20 ml 40 ml ◆ TRIpure Reagent 抽提指南 ◆ 目录号 RP02 ◆ 使用手册 ◆ 实验室使用，仅用于体外 ◆ TRIpure Reagent 抽提指南 ◆ 目录号 RP02 ◆ 使用手册 ◆ 实验室使用，仅用于体外 ◆ TRIpure Reagent 抽提指南 ◆ 目录号 RP02 ◆ 使用手册 ◆ 实验室使用，仅用于体外 ◆ EASYspin 纤维类组织 RNA快速提取试剂盒 ◆ 目录号 HXR44 ◆ 使用手册 ◆ 实验室使用，仅用于体外 - 2 - 蛋白酶 K粉 （可选）40mg/ml -20℃ 10mg 20mg RNase-free 吸附柱 RA和收集管 室温 20套 50套 本试剂盒在室温储存 6 个月不影响使用效果。 储存事项： 1. 所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直 接使用，可在 37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。 2. 不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此 运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。 3. 为避免降低活性，方便运输，提供蛋白酶 K为冻干粉状，收到后，可短暂离心后， 加入 0.25ml （20次）和 0.5ml （50 次）RNase-free H2O溶解。因为反复冻融可 能会降低酶活性，因此溶解后可立即按照每次使用量分装冻存，－20℃保存。 4. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH 值变化，各溶液使用后应及 时盖紧盖子。 ? 产品介绍： 独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞 RNA酶，然后用乙醇调节结合 条件后,RNA 在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速 的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， 最后低盐 的 RNase free H20 将纯净 RNA从硅基质膜上洗脱。 ? 产品特点： - 3 - 1. 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附 量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。 2. 不需要使用有毒的苯酚，氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。 3. 快速，简捷，单个样品操作一般可在 30 分钟内完成。 4. 多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达 1.9～2.0，基本无 DNA残留, 可用于 RT-PCR，Northern-blot和各种实验。 ? 注意事项 1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机， 如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。 2. 需要自备乙醇， β-巯基乙醇，一次性注射器，研钵，水浴锅等。 3. 裂解液RLT 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾 染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。 4. 预防RNase 污染，应注意以下几方面： 1) 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌，可能导致RNase 污染。 2) 使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。 3) RNA 在裂解液RLT 中时不会被RNase 降解。但提取后继续处理过程中应使用不 含RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4 小时，塑料器皿可在0.5 M NaOH 中浸泡10 分钟，然后用水彻底清洗，再灭菌，即可去除RNase。 4) 配制溶液应使用无 RNase 的水。（将水加入到干净的玻璃瓶中，加入 DEPC 至终 浓度 0.1%( v/v)，37℃放置过夜，高压灭菌。） 5. 关于DNA 的微量残留： - 4 - 一般说来任何总 RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免 DNA 的微量残留,本 公司的 EASYspin 系列 RNA提取