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人C-反应蛋白CRP酶联免疫分析试剂盒使用说明书.PDF

发布:2018-10-24约1.31万字共8页下载文档
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C- (CRP) 人 反应蛋白 酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,肺泡灌洗液 及相关液体样本中C-反应蛋白(CRP)的含量 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人C-反应蛋白(CRP)水平。用纯化的人C-反应 蛋白(CRP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中加入C-反应蛋白(CRP), 再与HRP 标记的C-反应蛋白(CRP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗 涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终 的黄色。颜色的深浅和样品中的C-反应蛋白(CRP)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测 定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人C-反应蛋白(CRP)的含量。 试剂盒组成: 试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置 保存 说明书 1份 1份 封板膜 2 片(48) 2 片(96) 密封袋 1个 1个 酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存 标准品:2700μg/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存 酶标试剂 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 样品稀释液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂A 液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂B 液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液 (20ml×20 倍)×1瓶 (20ml×30 倍)×1瓶 2-8℃保存 样本处理及要求: 1. 血清:室温血液自然凝固 10-20分钟,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上 清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合 10-20 分钟后,离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次 离心。 3. 尿液:用无菌管收集,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程 中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20 分钟左右(2000-3000 转/ 1 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS (PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞 浓度达到 100 万/ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分 钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备 用。标本融化后
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