官方说明书鸡热休克蛋白 70(HSP-70)酶联免疫分析试剂盒使用说明书.pdf

chicken heat shock protein 70 (HSP-70) elisa immunoassay kit Manual /file/2459367 From ManualL ManualL collects and classifies the global product instrunction manuals to help users access anytime and anywhere, helping users make better use of products. Home: / Chinese: / This Manual: /file/2459367 热休克蛋白70(HSP-70)酶联免疫分析试剂盒使用说明书 产品编号：E0873Ch 本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断! 预期应用 ELISA 法定量测定鸡血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中热休克蛋白 70(HSP-70)含量。 实验原理 用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗 HSP-70 抗体的微孔中依次加入标本 或标准品、生物素化的抗HSP-70 抗体、HRP 标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB 显色。 TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的 用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样 品中的HSP-70 呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。 试剂盒组成及试剂配制 1. 酶联板：一块（96 孔） 2. 标准品 （冻干品）：2 瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml ，盖好后静置10 分钟以上， 然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为10 ng/ml ，做系列倍比稀释(注：不要直接在板中进 行倍比稀释)后，分别稀释10 ng/ml ，5 ng/ml ，2.5 ng/ml ，1.25 ng/ml ，0.625 ng/ml ，0.312 ng/ml ， 0.156 ng/ml ，样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml ，临用前15 分钟内配制。 如配制5 ng/ml 标准品：取0.5ml （不要少于0.5ml ）10 ng/ml 的上述标准品加入含有0.5ml 样品稀释液的Eppendorf 管中，混匀即可，其余浓度以此类推。 3. 样品稀释液：1×20ml/瓶。 4. 检测稀释液A ：1×10ml/瓶。 5. 检测稀释液B ：1×10ml/瓶。 6. 检测溶液A ：1×120ul/瓶（1:100）临用前以检测稀释液A 1:100 稀释，稀释前根据预先计 算好的每次实验所需的总量配制 （每孔 100ul ），实际配制时应多配制 0.1-0.2ml 。如 10ul 检测溶液A 加990ul 检测稀释液A 的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。 7. 检测溶液B ：1×120ul/瓶（1:100）临用前以检测稀释液B 1:100 稀释。稀释 法同检测溶 液A 。 8. 底物溶液：1×10ml/瓶。 9. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25 倍。 10. 终止液：1×10ml/瓶（2N H SO4 ）。 2 11. 覆膜：1×5 张 标本