β-环煳精增敏荧光法测定山楂中熊果酸的研究.pdf

维普资讯 第 24卷第3期 分 析 科 学 学 报 2008年 6月 Vo1．24 No．3 JOURNALOFANALYTICALSCIENCE June 2008 文章编号 ：1006～6144 2008 03—0350—03 J6；一环糊精增敏荧光法测定山楂 中熊果酸的研究 赵二劳 ，李满秀，刘 芳，王艳芹 忻州师范学院化学系，山西忻州 034000 摘 要 ：利用荧光光谱法探讨 了熊果酸与 环糊精 CD 间的超分子相互作用，结果 表 明：熊果酸与 环糊精可形成 1：1的超分子包合物，包合常数为 37L／otol。包合物在 2ex／x。一360／409nm处发射强荧光 ，据此建立了测定熊果酸的荧光分析方法。熊果酸 浓度在 0．71～10．14 g／mL范围内与其 荧光强度呈 良好的线性关系，检 出限为 0．228 x／g／mL。该方法操作简便 ，精密度、重现性好 ；用于山楂 中熊果酸的9n,4定，结果满意。 关键词 ：熊果酸；环糊精 ；荧光分析法 ；超分子包合物 中图分类号：O657．39 文献标识码：A 熊果酸 UrsolicAcid 又名乌索酸、乌苏酸，是存在于山楂等天然植物中的一种三萜类化合物，具有镇 静 、抗炎、抗菌、抗糖尿病 、抗溃疡、降低血糖等多种生物学效应。近年来还发现它具有抗致癌 、抗促癌 、诱 导 F9畸胎瘤细胞分化和抗血管生成作用 。另外，熊果酸具有 明显 的抗氧功能，因而被广泛地用作医药和 化妆品原料 。目前 ，有关熊果酸的检测方法有分光光度法 、薄层扫描法嘲 、高效液相色谱法C埘，但用 荧光法测定熊果酸未见文献报道。 本文利用荧光光谱法研究了熊果酸和 环糊精的相互作用，发现二者可形成 1：1的主客体超分子包 合物 ，使荧光量子产率得到显著提高，在 ／x 一360／409nm处发射强荧光。据此 ，建立 了高灵敏度与高 选择性测定熊果酸的荧光分析法 ，并用于山楂 中熊果酸的测定，为 山楂资源的开发利用提供了有益 的参 考 。 1 实验部分 1．1 仪器与试剂 F-4500型荧光分光光度计 Et本，Et立公司 ；pHS一3TC精密数显酸度计 上海天达仪器有 限公司 ； ALl04电子天平 梅特勒一托利多仪器 上海 有限公司 。 熊果酸溶液 ：准确称取熊果酸对照品 中国药品生物制品检定所 10mg，加无水乙醇溶解后置于 100 mL容量瓶中，稀释至刻度 ，摇匀，浓度为 100x／g／mL，必要时加以稀释。环糊精溶液：准确称取 2．8375g 环糊精 北京奥博生物技术责任有限公司 ，置于 250mL容量瓶中，加水稀释至刻度 ，摇匀，浓度为 0．01 mol／L。三酸混合溶液 ：取 H。BO。0．6183g，85 H。PO 0．68mL，36 乙酸 1．16mL，用蒸馏水配成 250 mL的溶液 ，然后与 0．2mol／LNaOH 的溶液 以不 同体积混合 ，配制不同pH 的缓冲液 。实验所用试剂均 为分析纯 ，水为石英亚沸二次蒸馏水 。 山楂购于忻州本草堂大药房 。 1．2 实验方法 移取 10l~g／mL的熊果酸溶液 1mL于 10mL比色管 中，依次加入 6．0mL0．01mol／L#CD溶液 ， 1．0mLZ酸缓冲液 pH2．35 ，以水稀释至刻度，充分振荡，静置 20rnin后 ，在 …／x 一36o／4o9nm处测 其荧光强度，激发及发射通带均为 10nm。 收稿 日期 ：2007—08—23 修 回 日期 ：2007～12—21 通讯联系人 ：赵二劳，男，副教授 ，主要从事分析化学的教学和科研工作 350 维普资讯 第 3期 分 析 科 学 学 报 第 24卷 2 结果与讨论 2．1 激发与发射光谱 按实验方法操作，结果发现：熊果酸在 ．；L一360nm，；．L。 一 408nm处发射荧光，加入 环糊精后，荧光强度明显增加， 峰位无明显变化 ，激发和发射光谱如 图 1所示。熊果酸在水 中荧光量子产率较低，环糊精的加入使熊果酸溶液的荧光 座机电话号码0座机电话号码0座机电话号码0 |nm 发射得到显著增强，且随 环糊精浓度 的增大而增大。这种 增敏作用是 由于熊果酸分子在疏水作用 、范德华力及氢键力 图 1 熊果酸的荧光光谱 Fig．1 Fluorescencespectraoftheursolicacid 等非共价键作用的驱动下，进入 环糊精空腔形成超分子包 1，1：Excitation and emission spectraofthe ursolic 合物 ，环糊精空腔所提供的非极性微环境使熊果酸分子 的 acid； 2，2 ：Excitation and emission spectraoftheursol