均匀设计法优化重组大肠杆菌产酮基还原酶培养基_石小丹.pdf

， （ ）： 天津农业科学 Tianjin Agricultural Sciences 2015 21 6 1-6 植植物生理与生物技术物生理与生物技术 均匀设计法优化重组大肠杆菌产酮基还原酶培养基 1 1,2 1 1 2 石小丹 ，李 啸 ，张 松 ，罗宇笛 ，谈亚丽 （1. 三峡大学生物与制药学院，湖北宜昌443003 ；2. 安琪酵母股份有限公司，湖北宜昌443003） 摘 要：系统研究了典型碳源、氮源、金属离子、磷酸盐以及初始pH 值等因素对重组大肠杆菌产酮基还原酶的影响。单因素试 验结果表明，甘油、酵母浸粉FM888、酵母蛋白胨FP101、MgSO ·7H O 以及离子浓度为0.1 mol ·L-1 pH 值为T7 的磷酸缓冲液对 4 2 菌体生长以及酶活的表达有一定的促进作用。通过均匀设计试验及分析得到培养基的最优配方：甘油6.86 g ·L-1, FM888 19.53 g ·L-1, FP101 8.37 g ·L-1, MgSO ·7H O 2.50 g ·L-1, K HPO 14.96 g·L-1, KH PO 7.34 g ·L-1 。优化条件下酶活为431.21 U ·mL-1 ，比优 4 2 2 4 2 4 -1 化前（70.25 U ·mL ）提高了5.13 倍。此研究可为工业化大生产提供理论指导。 关键词：酮基还原酶；重组大肠杆菌；培养基优化；均匀设计 中图分类号： 文献标识码： 编码： TQ920.1 A DOI 10.3969/j.issn.1006 －6500.2015.06.001 Optimization of Fermentation Medium for Keto Reductase Production from Recombinant Escherichia coli Using Uniform Design 1 1,2 1 1 2 SHI Xiao-dan , LI Xiao , ZHANG Song , LUO Yu-di , TAN Ya-li (1. College of Biological and Pharmaceutical Engineering, China Three Gorges University, Yichang, Hubei 443003,China; 2. Angel Yeast Limited Company, Yichang, Hubei 443003, China) Abstract : The effects of a number of factors on the production of keto reductase were systematically studied, typically including car- bon source, nitrogen source, phosphate and initial pH. The research results of single factor experiment showed that the growth and en-