大肠杆菌的培养和分离.pptx

大肠杆菌的培养和分离微生物简单介绍放线菌

单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体（种群）菌落是鉴定菌种的重要依据

大肠杆菌结构异养型，兼性厌氧型，革兰氏阴性(红色)(G-)应用

问题1：用什么培养大肠杆菌？培养基。按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。凝固剂琼脂扩大培养，工业生产分离纯化，鉴定菌种，计数，保藏选择培养基鉴定培养基天然培养基合成培养基

成分作用主要来源碳源主要作能源物质无机碳(CO2)或有机碳(糖类)氮源合成含N类化合物N2，NH3，铵，硝酸盐尿素，牛肉膏，蛋白胨无机盐调节渗透压等水生长因子调节促生长维生素，Aa，碱基等细菌中性偏碱，霉菌中性偏酸。如鉴定分解尿素的细菌，在培养基中添加酚红，产生红色反应。LB液体培养基与LB固体培养基。

1234加入青霉素的培养基:分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基:分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基:分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基:分离自养型微生物

问题2：在培养过程中如何进行维持无菌状态？芽孢为细菌的休眠体，对不良环境有很强耐受性强烈，完全无菌消毒VS灭菌较为温和的方法，如酒精灭菌消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。

灭菌消毒技术大汇总1、高压蒸汽灭菌法1kg/cm2、121℃下维持15min.0.5kg/cm2、90℃下维持30min.防止温度过高，葡萄糖分解碳化。2、灼烧灭菌法接种环、接种针玻璃刮刀

3、干热灭菌法G6玻璃纱漏斗过滤法160-170℃下加热1-2h。1其他三角瓶用封口膜、超净台操作（含紫外灯、过滤风）在接种时要速度快2

3、如何分离大肠杆菌划线分离法（平板划线分离法）划线的末端出现不连续的单菌落培养皿倒置12345

（稀释）涂布分离法玻璃刮刀放在酒精溶液中待用取出时要经过灼烧一般要稀释菌液进行培养稀释10-5—10-7倍，取0.1ml不同浓度的稀释液

4、大肠杆菌的培养和分离的过程溶解计算称量调pH分装加塞，包扎灭菌二倒平板、制斜面三大肠杆菌的培养四大肠杆菌的分离划线分离法（或涂布分离法）使所需细菌大量繁殖获得单菌落，纯化菌株五斜面接种培养目的菌株的纯培养和菌种保存一配制LB培养基,并灭菌

菌种管接种环（针）接种三角瓶（液体培养基）接种在固体培养基中

01如何设计对照？02如何把液体培养基配置成固体培养基？03如何完成菌液稀释？用什么液体来稀释菌液？04用什么方法来分离这种微生物？05该实验简单的设计思路是什么？实验2：分离以尿素为氮源的微生物

例1、某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题。（1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了和。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是和。（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是。（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种作为对照进行实验。（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐细菌，这种培养基被称为。

KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10g尿素1g琼脂15g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到100mL（1）此培养基能否用于植物组织培养？

（2）培养基中加入尿素的目的是