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细胞基因组dna提取 组织基因组DNA提取.doc

发布:2017-01-13约1.51万字共36页下载文档
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细胞基因组dna提取 组织基因组DNA提取 导读:就爱阅读网友为您分享以下“组织基因组DNA提取”的资讯,希望对您有所帮助,感谢您对92的支持! 第三节 从动物组织提取基因组DNA 一、材料 哺乳动物新鲜组织。 二、设备 移液管、高速冷冻离心机、台式离心机、水浴锅。 三、试剂 1、分离缓冲液:10mmol/L Tris·Cl pH7.4, 10mmol/L NaCl, 25mmol/L EDTA。 2、其它试剂:10% SDS,蛋白酶 K (20mg/ml或粉剂),乙醚,酚:氯仿:异戊醇(25:24:1),无水乙醇及70%乙醇,5mol/L NaCl,3mol/L NaAc,TE。 四、操作步骤: 1. 切取组织5g左右,剔除结缔组织,吸水纸吸干血液,剪碎放入研钵(越细越好)。 2. 倒入液氮,磨成粉末,加10ml分离缓冲液。 3. 加1ml 10% SDS, 混匀,此时样品变得很粘稠。 4. 加50ul或1mg 蛋白酶 K, 37℃保温1-2小时, 直到组织完全解体。
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