GB 4789.38-2012食品安全国家标准　食品微生物学检验　大肠埃希氏菌计数.pdf

中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 GB4789.38-2012 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠埃希氏菌计数 2012-05-17发布 2012-07-17实施 中华人民共和国卫生部 发布 GB4789.38-2012 前 言 本标准代替GB/T4789.38-2008 《食品卫生微生物学检验 大肠杆菌计数》。 本标准与GB/T4789.38-2008相比，主要变化如下： ——修改了标准的中文名称； ——修改了培养基和试剂； ——将“第二法 大肠杆菌VRB-MUG 平板计数法”改为“大肠埃希氏菌平板计数法（第二法）”； TM ——删除了“第三法 大肠杆菌Petrifilm 测试片计数法”； ——修改了附录A。 I GB4789.38-2012 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠埃希氏菌计数 1 范围 本标准规定了食品中大肠埃希氏菌（Escherichiacoli）计数的方法。 本标准适用于食品中大肠埃希氏菌的计数，其中大肠埃希氏菌平板计数法（第二法）不适用于贝类产 品。 2 术语和定义 2.1 大肠埃希氏菌 Escherichia coli 大肠杆菌 广泛存在于人和温血动物的肠道中，能够在44.5℃发酵乳糖产酸产气，IMViC（靛基质、甲基红、VP 试验、柠檬酸盐）生化试验为＋＋－－或－＋－－的革兰氏阴性杆菌。以此作为粪便污染指标来评价食品 的卫生状况，推断食品中肠道致病菌污染的可能性。 2.2 最可能数 基于泊松分布的一种间接计数方法，简称为MPN。 3 设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： a） 恒温培养箱：36 ℃±1 ℃； b） 冰箱：2 ℃～5 ℃； c） 恒温水浴箱：44.5 ℃±0.2 ℃； d） 天平：感量为0.1g； c） 均质器； d） 振荡器； e） 无菌吸管：1mL（具 0.01mL 刻度）、10mL（具 0.1mL 刻度）或微量移液器及吸头； f） 无菌锥形瓶：容量 500mL； g） 无菌培养皿：直径 90mm； h） pH计或pH比色管或精密pH试纸； i） 菌落计数器； j） 紫外灯：波长360nm～366nm，功率≤6W。 4 培养基和试剂 4.1 月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤：见附录A中A.1。 4.2 EC肉汤（E.colibroth）：见附录A中A.2。 4.3 蛋白胨水：见附录A中A.3。 1 GB4789.38-2012 4.4 缓冲葡萄糖蛋白胨水[甲基红(MR)和V-P试验用]：见附录A中A.4。 4.5 西蒙氏柠檬酸盐培养基：见附录A中A.5。 4.6 磷酸盐缓冲液：见附录A中A.6。 4.7 伊红美蓝（EMB）琼脂：见附录A中A.7。 4.8 营养琼脂斜面：见附录A中A.8。 4.9 结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）：见附录A 中A.9。 4.10 结晶紫中性红胆盐-4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖苷琼脂（VRBA-MUG）：见附录A 中A.10。 4.11 革兰氏染色液：见附录A中A.11。 4.12 Kova