卫生微生物月食品微生物检验方法的国内外研究进展.doc

食品微生物检验技术的国内外研究进展 陆杰明 摘要：近30年来，随着国际食品经济和贸易的发展，全球性食品安全问题备受 关注，故对食品微生物的检验技术越來越重视。本文介绍了近几年來国内外对食 品微生物的检验技术，以及提出对检验方法方向的展望。 关键词：食品微生物检验；分子生物学技术；免疫学；仪器化 Research progress of food microbiological testing methods at home andabroad Lu Jie-Ming Abstract: In the past 30 years, with the development of international food economy and trade, the global food safety problem has attracted much attention. This paper introduces the research progress of food microbiological inspection methods in recent years and puts forward the prospect of testing methods. Keywords:Food microbe testing; Molecular biology technology; immunology; Instrumentation. 引言 随着人们生活水平的不断提高，食晶安全问题逐渐成为各国政府、公众关注 的焦点问题。食品达到细菌学的卫生条件是最终制品中不允许存在致病菌，即使 存在食物中毒菌，也必须达到不损害人体健康的安全水平。由于食品微生物污染 的广泛发生，严重影响人民的健康，因此食品微生物检验工作对评价食品卫生质 量，保证消费者饮食卫生有着极为重要的作用，并且研究灵敏度更高、特异性更 强、简便快捷的食品安全检测技术和方法，建立和完善食品安全微牛物检测技术 和体系越来越重要。本文将介绍近儿年来国内外食品微生物检骑中具有代表性的 几种检验方法 国内外食品微生物检验方法的进展 2. 1电阻抗法 电阻抗法的原理是电阻抗法的主要原理是检测培养基中的大分子在电中性 或弱离子条件下的微弱电位变化。从而在未出现菌落之前就能检测到微生物的存 在『1』。电阻抗法一次可同时测定128份试样，操作简便、快捷，可避免人工操作 造成的主观判断差异，全部结果量化并由打印机自动打出。但是电子讯号、食品 配方、培养基、温度等变化都会影响检测结果，因此制作校正曲线必须在同一配 方试样间进行，也就是说校正曲线的服务对象必须是单一的，该方法对食品中菌 落总数测定的改进和对食品生产企业快速监测食品中细菌污染有很大的作用［2］。 2. 2分子生物学技术 核酸探针技术 1?以DNA为靶目标的检验 中国开展的食品微生物检验项目主要包括细菌总数、大肠菌群、沙门菌、霉 菌和酵母以及毒素等［3］。所以，有关的检测有很多是针对细菌而来的。DNA是细 菌的主要遗传物质，所以设计的探针一般是目标DNA的互补序列。在设计探针时 要依照待检测微生物特异的DNA序列。比如在设计检测产气荚膜梭菌的探针时， 克隆的是产气荚膜梭菌的产毒基因［4］ o致肠病的大肠杆菌则针对其致肠病的基 因序列来设计。这种检验在食品微生物检测中的应用研究十分活跃，例如食品中 的大肠杆菌(Escherichia coli)、沙门菌(Salmonella)、志贺菌(Shigella spp)、 小肠结肠炎耶尔森(Yersinia enterocoliti-ca) 产单核细李斯特菌(Listeria monocytogenes) 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的检测等。 2.以rRNA为靶目标的检验 该种检验方法常使用AccuProbe基因作为探针，其原理是利用Acridinium ester作为荧光发光物质，标记特异性单链作为探针，与待测细菌中的核糖体 RNA(rRNA)互补，形成稳定的DNA:RNA杂交体。选择试剂再将未结合的多余探针破 坏掉，最后通过发光仪检测标记的杂交体。翁文川等应用该方法检测食品中产单 核细胞李斯特菌，结果表明，采用该基因探针方法检测食品中产单核细胞李斯特 菌特界性强，需要的时间短。吴仲梁等也用AccuProbe检测食品中的产单核细胞 李斯特菌，同样证明该方法具有正确、灵敏、快速、简便等优点，适于推广应用. ［6］ 聚合酶链式反应(PCR)技术 聚合酶链反应，是一种在体外模拟自然D7A复制过程，对特定的D7A或D7A 片段进行快速扩增的方法。PCR技术除了具有核酸分子杂交的优点如特界性强、 可从基因水平进行诊断和同时检测大量样品等外，比核酸分子