水产品中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺残留量的测定.docx

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水产品中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺残留量的测定

第一法气相色谱法

1范围

本文件规定了水产品中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺残留量检测的制样和气相色谱测定方法。

本文件适用于鱼、虾、鳖、贝、海参可食组织中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及氟苯尼考胺残留量的测定，其他水产品参照执行。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T30891水产品抽样规范

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

试样中残留的氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺，在碱性条件下用乙酸乙酯提取，正己烷去脂，固相萃取柱净化，硅烷化试剂衍生化，气相色谱法检测，外标法定量。

5试剂与材料

除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水。

5.1试剂

5.1.1乙腈（CH3CN）：色谱纯。

5.1.2甲醇（CH3OH）：色谱纯。

5.1.3正己烷（C6H14）：色谱纯。

5.1.4乙酸（CH3COOH）：色谱纯。

5.1.5乙酸乙酯（C4H8O2）：色谱纯。

5.1.6甲苯（C7H8）：色谱纯。

5.1.7浓氨水（NH3?H2O）。

5.1.8N,O-双（三甲基硅烷基）三氟乙酰胺（BSTFA）：C8H18F3NOSi2。

5.1.9三甲基氯硅烷（TMCS）：C3H9ClSi。

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5.2溶液配制

5.2.1乙酸乙酯-氨水：取浓氨水2mL，用乙酸乙酯稀释至100mL。现用现配。

5.2.2甲醇-氨水：取浓氨水2mL，用甲醇稀释至100mL。现用现配。

5.2.35%乙酸溶液：取乙酸5mL，用水稀释至100mL。

5.2.4衍生化试剂：取N,O-双（三甲基硅烷基）三氟乙酰胺（BSTFA）与三甲基氯硅烷（TMCS），按体积比99:1混合。现用现配。

5.3标准品

氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考、氟苯尼考胺，含量均≥98%。具体见附录A。

5.4标准溶液制备

5.4.1标准储备液：取氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考、氟苯尼考胺标准品各15mg，精密称定，分别加乙腈适量使溶解并稀释定容至100mL棕色容量瓶，配制成浓度均为150μg/mL的标准储备液。－18℃以下保存，有效期12个月。

5.4.2混和标准工作液：分别准确量取氯霉素标准储备液1mL，甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺各10mL于50mL容量瓶，用乙腈稀释至刻度，制成氯霉素浓度为3μg/mL，甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺浓度均为30μg/mL的混合标准工作液。－18℃以下保存，有效期3个月。

5.5材料

5.5.1混合型强阳离子交换固相萃取柱：60mg/3mL，或相当者。

5.5.2鸡心瓶：100mL。

5.5.3聚乙烯离心管：15mL、50mL，具塞。

5.5.4玻璃离心管：10mL，具塞。

6仪器设备

6.1气相色谱仪，配63Ni电子捕获检测器。

6.2旋转蒸发仪。

6.3离心机。

6.4涡旋混合器。

6.5分析天平：感量0.00001g和0.01g。

6.6氮吹仪。

6.7超声波提取仪。

6.8固相萃取装置。

7试样的制备与保存

7.1试样的制备

按GB/T30891的要求制样。

a）取均质后的供试样品，作为供试试样；

b）取均质后的空白样品，作为空白试样；

c）取均质后的空白样品，添加适宜浓度的标准溶液，作为空白添加试样。

7.2试样的保存

-18℃以下保存。

8测定步骤

8.1提取

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称取试料（5±0.02）g，置50mL具塞玻璃离心管中，加乙酸乙酯-氨水20mL，立即涡旋1min，超声15min，4000r/min离心5min，取上清液于100mL鸡心瓶中，重复提取一次，合并上清液，加入5%乙酸溶液3mL，振荡混匀，40℃旋转蒸发至约1.5mL，备用。

8.2净化

取备用液于10mL离心管，用5%乙酸1.5mL洗涤鸡心瓶，洗液并于离心管。加正己烷5mL，涡旋混合1min，4000r/