动物性食品中青霉素类药物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法.docx

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动物性食品中青霉素类药物残留量的测定液相色谱-串联质谱法

1范围

本文件规定了动物性食品中12种青霉素类药物残检测的制样和液相色谱-串联质谱测定方法。

本文件适用于猪、牛、羊、鸡的肌肉、肝脏、肾脏、脂肪，鱼（皮+肉）和牛、羊奶中青霉素G、阿莫西林、氨苄西林、氯唑西林、双氯西林、苯唑西林、萘夫西林、青霉素V、阿洛西林、甲氧西林、非奈西林和哌拉西林共12种青霉素类药物残留量的检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T30891-2014水产品抽样规范

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

试样中的青霉素类药物经乙腈-水溶液提取，脂质净化固相萃取柱净化，液相色谱-串联质谱测定，基质匹配标准溶液内标法定量。

5试剂与材料

除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

5.1试剂

5.1.1乙腈（CH3CN）：色谱纯。

5.1.2甲酸（HCOOH）：色谱纯。

5.1.3乙腈。

5.2溶液配制

5.2.130%乙腈水溶液：取乙腈300mL，加水稀释至1000mL，混匀。

5.2.20.1%甲酸水溶液：取甲酸0.5mL，加水稀释至500mL，混匀。5%氨水乙腈溶液：取氨水5mL，用乙腈稀释至100mL，混匀。

5.3标准品

5.3.1青霉素药物标准品：青霉素G、阿莫西林、氨苄西林、氯唑西林、双氯西林、苯唑西林、萘夫西林、青霉素V、阿洛西林、甲氧西林、非奈西林、哌拉西林含量均≥95.0%。详细信息见附录A。标准品也可为相应的盐。

5.3.2同位素内标标准品：阿莫西林-D4、萘夫西林-D5、苯唑西林-D5、氨苄西林-D5，含量均≥95.0%，详细信息见附录A。

5.4标准溶液制备

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5.4.1标准储备液：分别取青霉素类药物标准品各适量（相当于各有效成分约10mg），精密称定，用30%乙腈水溶液溶解并定容至10mL棕色容量瓶，摇匀，配制成浓度为1mg/mL标准储备液。-18℃避光保存，有效期1个月。

5.4.2内标储备液：分别取阿莫西林-D4、萘夫西林-D5、苯唑西林-D5、氨苄西林-D5标准品各10mg，精密称定，用30%乙腈水溶液溶解并定容至10mL棕色容量瓶，摇匀，配制成浓度为1mg/mL内标标准储备液。-18℃避光保存，有效期1个月。

5.4.3混合标准中间液：分别移取标准储备液各100μL，于10mL容量瓶中，用30%乙腈水溶液稀释至刻度，配制成浓度为10μg/mL的混合标准中间液。-18℃避光保存，有效期5d。

5.4.4内标中间液：分别移取内标储备液各100μL，于10mL容量瓶中，用30%乙腈水溶液稀释至刻度，配制成浓度为10μg/mL的内标中间液。-18℃避光保存，有效期5d。

5.4.5混合标准工作液：移取混合标准中间液1000μL，于10mL容量瓶中，用30%乙腈水溶液稀释至刻度，配制成浓度为1.0μg/mL的混合标准中间液。-18℃避光保存，有效期5d。

5.4.6内标工作溶液：移取内标中间液1000μL、100μL，于10mL容量瓶中，用30%乙腈水溶液稀释至刻度，配制成浓度为1.0μg/mL、0.1μg/mL的内标工作液。-18℃避光保存，有效期5d。

5.5材料

5.5.1脂质净化固相萃取柱：300mg/3mL，或相当者。

5.5.2尼龙微孔滤膜：0.22μm。

5.5.3具塞离心管：50mL和15mL。

6仪器设备

6.1液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源。

6.2分析天平：感量0.00001g和0.01g。

6.3旋涡混合器。

6.4超声波清洗器。

6.5离心机：≥8000r/min。

6.6均质机。

6.7氮吹仪。

6.8固相萃取装置。

7试样的制备与保存

7.1试样的制备

7.1.1畜禽肉、组织及鱼

取适量新鲜或解冻的空白或供试组织，绞碎，并使均质。鱼类按