饲料中香芹酚和百里香酚含量的测定高效液相色谱法.pdf

CS65.120

CCSB46

团体标准

T/SXSL00X-2022

饲料中香芹酚和百里香酚含量的测定

高效液相色谱法

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performanceliquidchromatography

（征求意见稿）

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

陕西省饲料协会发布

饲料中香芹酚和百里香酚含量的测定高效液相色谱法

1范围

本文件规定了饲料中香芹酚和百里香酚的高效液相色谱测定方法。

本文件适用于配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料和精料补充料中香芹酚和百里香酚的

测定。

本文件香芹酚和百里香酚的检出限为0.25mg/kg，定量限为0.75mg/kg。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引

用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修

订单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T20195动物饲料试样的制备

3术语和定义

本文件没有特别需要界定的术语和定义。

4原理

试样中的香芹酚和百里香酚用乙腈提取，经过C18吸附材料和硅酸镁吸附材料净化、过滤后注

入高效液相色谱仪，用紫外检测器检测，外标法定量。

5试剂和材料

除特别注明外，仅使用分析纯的试剂。

4.1水，GB/T6682，一级水。

4.2乙腈，色谱纯。

4.3无水乙醇。

4.4冰乙酸。

4.5香芹酚标准贮备液（1mg/mL）：准确称取10mg（精确至0.00001g）香芹酚标准品（CAS:499-75-2，

纯度≥98.0%）于10mL棕色容量瓶中，用无水乙醇溶解定容，混匀。于4℃以下保存，有效期6

个月。

4.6百里香酚标准贮备液（1mg/mL）：准确称取10mg（精确至0.00001g）百里香酚标准物品

（CAS:89-83-8，纯度≥98.0%）于10mL棕色容量瓶中，用无水乙醇溶解定容，混匀。于4℃以下

保存，有效期6个月。

4.7混合标准中间液（100μg/mL）：准确吸取香芹酚标准贮备液和百里香酚标准贮备液各1mL于

10mL棕色容量瓶中，用初始流动相（4.9）定容，混匀。于4℃以下保存，有效期为3个月。

4.8标准系列溶液：准确吸取混合标准中间液（4.7）0.02mL、0.1mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、

10.0mL于100mL棕色容量瓶中，用流动相（4.9）稀释定容，配制成浓度分别为0.02μg/mL、0.1μg/mL、

0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、10.0μg/mL的系列标准工作溶液。临用现配。

4.9流动相：用水稀释10mL冰乙酸至1000mL，混匀。量取500mL与500mL乙腈混匀。临用

现配。

4.10C18吸附材料。

4.11硅酸镁吸附材料。

4.12滤膜：有机系，0.22μm。

5仪器设备

5.1高效液相色谱仪：配备紫外检测器或二极管阵列检测器。

5.2分析天平：感量0.00001g和0.0001g。

5.3离心机：转速≥10000r/min。

5.4超声波提取仪。

5.5涡轮混合器：转速≥1000r/min。

6样品

选取具有代表性的样品至少500g，按照GB/T20195试样制备方法，用四分法缩减至200g，

全部粉碎，全部通过0.45μm孔径分析筛，充分混匀后，装入密闭容器中，作为试样备用。

7试验步骤

7.1提取

平行做两份试验。称取2g（精确至0.0001g）试样于50mL离心管中，准确加入10mL乙腈（4.2），

涡旋1min，超声提取20min，期间每隔5min摇一次，